硫酸鈣復合骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2功能多肽修復骨缺損的研究.pdf

1、本研究分為二部分：
　　第一部分：骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2功能多肽的合成及其體外成骨誘導活性研究
　　目的:研究骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2功能多肽P24的合成及其體外成骨誘導活性。
　　方法:FMOC/tBu固相合成法合成骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)核心區(qū)的功能多肽P24。配備含10μg/ml和30μg/ml P24的兩種SD大鼠間充質干細胞(MSC)完全培養(yǎng)液,與SD大鼠MSC完全培養(yǎng)液及SD大鼠MSC成骨誘導完全培養(yǎng)液分組培

2、養(yǎng)SD大鼠MSC。培養(yǎng)2周和3周時分別檢測各組堿性磷酸酶(ALP)活性。
　　結果:FMOC/tBu固相合成法成功合成了BMP-2的功能多肽P24。培養(yǎng)2周和3周時,含30μg/ml P24的完全培養(yǎng)液組ALP活性明顯高于成骨誘導完全培養(yǎng)液組。
　　結論:通過FMOC/tBu固相合成法合成的BMP-2的功能多肽P24具有體外成骨誘導活性,含30μg/ml P24的MSC完全培養(yǎng)液成骨誘導能力最強。
　　第二部分：硫酸鈣

3、復合骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2多肽修復骨缺損的實驗研究
　　目的：研究硫酸鈣（CS）復合BMP-2功能多肽P24修復骨缺損的能力。
　　方法：新西蘭大白兔60只，隨機分為5組，即空白組（A組）、CS組（B組），50μgP24/2gCS組（C組），100μgP24/2gCS組（D組），200μgP24/2gCS組（E組）。在兔股骨髁造成直徑7mm，深10mm的腔隙性骨缺損，按照分組植入材料。術后第4、8、12周分組處死兔子，分別進行大

4、體標本、X線、Micro-CT以及組織學觀察，比較各組材料修復骨缺損的能力。
　　結果：大體標本觀察：術后12周，A組骨缺損仍然明顯，B組骨缺損區(qū)大部分修復，C、D、E組骨缺損完全修復。X線觀察：對術后12周各組標本骨缺損修復情況進行X線評級，C、D、E組明顯優(yōu)于B組，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Micro-CT檢測：術后12周骨計量學指標顯示，C、D、E組骨密度（BMD）、骨體積分數(shù)（BV/TV）、骨小梁數(shù)量（Tb.N）

5、及結構模型指數(shù)（SMI）的測量結果均優(yōu)于B組，D、E組各項指標均優(yōu)于C組，其差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。組織學觀察：術后12周，A組骨缺損明顯，基本由纖維結締組織填充；B、C、D、E組材料完全降解，骨缺損區(qū)域由新生骨填充，其中C、D、E組骨小梁密度高于B組，D、E組優(yōu)于C組。
　　結論：P24功能多肽在動物體內具有較強的促進骨修復的能力；復合P24功能多肽可提高硫酸鈣修復骨缺損的能力；按100μgP24/2gCS比例復合