P-選擇素和堿性成纖維細胞生長因子在球囊擴張術(shù)后兔頸總動脈壁的表達及意義.pdf

1、目的:經(jīng)皮腔內(nèi)血管成形術(shù)(pereutaneous transluminal angioplasty，PTA)是采用導(dǎo)管技術(shù)在X線導(dǎo)向監(jiān)視下，以加壓的特殊氣囊，壓榨動脈內(nèi)壁的粥樣斑塊，使內(nèi)膜狹窄的粥樣硬化殼被撐擴破裂，在加壓擴張的過程中，動脈中層的彈力纖維、膠原纖維和平滑肌細胞都被過度伸展，使管腔擴張，主要適用于擴張周圍動脈的狹窄和短段閉塞，是目前治療外周動脈慢性缺血性疾病最重要的治療技術(shù)之一。但是PTA后較高的血管再狹窄率是影響其長期

2、療效的主要原因，據(jù)統(tǒng)計PTA后6-12月的髂動脈的再狹窄率約為20％，股胭動脈的再狹窄率為30-50％。臨床應(yīng)用的動脈支架可以降低血管再狹窄發(fā)生率，其機制主要是通過支架本身的支撐作用阻止PTA后血管的彈性回縮，使管腔腔徑擴大，并在一定程度上對抗由病理性血管重塑導(dǎo)致的血管腔徑縮窄，由于支架對動脈壁的機械性損傷以及異物反應(yīng)可加重血管壁的急性和慢性炎癥過程，因此可能通過炎癥反應(yīng)在一定程度上刺激血管壁的異常增生，一旦血管壁異常增生導(dǎo)致的血管腔徑

3、縮小超過了動脈支架支撐作用造成血管腔徑擴大的補償，則仍會有血管再狹窄發(fā)生，因此，對血管壁異常增生機制的研究仍是防止血管再狹窄發(fā)生的重點。盡管人們對血管再狹窄的過程有所了解，但確切機制尚不十分明確，目前研究認為PTA后血管再狹窄的發(fā)生發(fā)展是動脈壁損傷后修復(fù)過程穩(wěn)態(tài)失衡的結(jié)果。 PTA后血管再狹窄的實質(zhì)是動脈損傷后的“愈合”效應(yīng)，是一系列血管活性物質(zhì)和生長因子介導(dǎo)的復(fù)雜的血管自身修復(fù)過程。目前的研究表明P-選擇素(P-selecti

4、n)是炎癥起始階段的重要因子，P-selectin的主要作用是參與介導(dǎo)白細胞與激活血小板和內(nèi)皮細胞之間可逆性黏附過程，并依賴鈣離子(Ca2+)參與，通過白細胞的碳水化合物sialyl lewis和P-選擇素糖蛋白配體-1(p-seletin glycoprotein ligand-1，PSGL-1)結(jié)合介導(dǎo)被激活的血管內(nèi)皮細胞與白細胞間快速而短暫的互相作用，使白細胞沿血流方向在血管內(nèi)皮細胞上滾動。P-selectin在冠狀動脈血管成形術(shù)

5、后和外周動脈血管成形術(shù)后發(fā)生再狹窄患者的血清表達升高，直接反應(yīng)了P-selectin與血管再狹窄具有密切關(guān)聯(lián)。血管平滑肌細胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)增殖是血管再狹窄發(fā)病機制中的一個關(guān)鍵部分，生長因子和趨化因子起著重要的作用。堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)的作用是很明確的，它可以被內(nèi)皮細胞，巨噬細胞和平滑肌細胞表達及分泌，并且可以

6、明顯的促進損傷動脈平滑肌細胞和內(nèi)皮細胞的增殖。基于以上的研究表明，P-selectin和bFGF是血管成形術(shù)后血管再狹窄過程中兩個有重要生理作用的化學(xué)因子，為了進一步了解P-selectin和bFGF在血管再狹窄過程中的作用，本實驗通過建立球囊擴張兔頸總動脈的動物模型，模擬PTA對動脈壁的損傷，探討PTA后早期動脈壁內(nèi)膜、中膜變化的特點，以及動脈壁P-selectin和bFGF的表達與該特點間的關(guān)系。方法:用球囊擴張兔左頸總動脈建立動脈

7、損傷動物模型，術(shù)后普通飼料喂養(yǎng)，在術(shù)后2d、7d、14d取因手術(shù)側(cè)動脈壁標(biāo)本，切片做HE染色觀察測量動脈壁內(nèi)膜厚度及中膜厚度的變化情況，以同只兔未手術(shù)側(cè)動脈做為對照組，通過統(tǒng)計學(xué)計算，了解其變化特點；同時應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測術(shù)后2d、7d、14d動脈壁上P-selectin、bFGF的陽性表達情況。結(jié)果:①球囊擴張后兔頸總動脈內(nèi)膜厚度在術(shù)后2d、7d與對照側(cè)相比無差異，通過t檢驗統(tǒng)計計算P值為0.414，術(shù)后14天球囊擴張側(cè)動脈內(nèi)膜

8、厚度與對照側(cè)相比有明顯差異，P值為0.046；②球囊擴張后兔頸總動脈內(nèi)膜出現(xiàn)增厚，而對照側(cè)的內(nèi)膜厚度無明顯改變；③球囊擴張后兔頸總動脈中膜厚度與對照側(cè)相比有明顯差異，球囊擴張后兔頸總動脈中膜厚度在術(shù)后2d及出現(xiàn)增厚，術(shù)后7d及術(shù)后14d較術(shù)后2d增厚明顯，P值分別為0.018和0.001，在術(shù)后14d時與術(shù)后7d相比無明顯差異，P值為0.217；同時對照側(cè)中膜也出現(xiàn)同樣的變化；④免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測球囊擴張?zhí)巹用}壁a-SMA(a-平滑肌

9、肌動蛋白)的表達，可以發(fā)現(xiàn)平滑肌細胞出現(xiàn)a-SMA的呈黃色或棕黃色的陽性表達，并隨時間的增加而陽性表達加強；⑤免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測P-selectin在球囊擴張后2d兔頸總動脈壁的呈強陽性表達，術(shù)后7d、14d陽性表達逐漸減弱；⑥免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測bFGF在球囊擴張后2d兔頸總動脈壁呈陽性表達，術(shù)后7d、14d陽性表達逐漸增強。結(jié)論:球囊擴張所致的機械損傷能導(dǎo)致動脈壁的增厚，以中膜層增厚為主，其中在損傷早期的增厚(術(shù)后7d內(nèi))最為明顯

10、，而7d以后的增厚無明顯變化。球囊擴張后導(dǎo)致的動脈壁中膜的增厚是以平滑肌細胞增生和移行為主要病理表現(xiàn)。P-selectin主要在球囊擴張后2d的手術(shù)側(cè)動脈內(nèi)膜上呈陽性表達，隨后陽性表達逐漸消失，可能與血管損傷的早期炎癥反應(yīng)有著密切的關(guān)系。bFGF在球囊擴張后2d、7d、14d的動脈壁上均有陽性表達，與球囊擴張后2d、7d、14d動脈壁上α-SMA的陽性表達一致，因此可能是球囊擴張后早期促進平滑肌細胞增殖的重要生長因子，同時可能還通過對全