細(xì)胞周期素D-,1-、p16蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文細(xì)胞周期素D、p16蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床意義姓名：白華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：曲陸榮20000301級(jí))12例，低分化(I級(jí))18例。按FIGO標(biāo)準(zhǔn)臨床分期分為I期28例，Ⅱ期11例，I期11例，Ⅳ期2例。選取同期因子宮肌瘤(漿膜下)行子宮切除術(shù)標(biāo)本26例為對(duì)照組，其中增殖期、分泌期內(nèi)膜各13例。對(duì)照組術(shù)前月經(jīng)周期規(guī)律，兩組術(shù)前均未接受化療、放療及性激素類藥物治療。實(shí)驗(yàn)方法采用免疫組織

2、化學(xué)方法(SP法)檢測(cè)CyclinD1、p16蛋白在52例子宮內(nèi)膜癌內(nèi)膜組織(實(shí)驗(yàn)組)和26例正常子宮內(nèi)膜(對(duì)照組)中的表達(dá)。所選標(biāo)本均經(jīng)10％中性甲醛常規(guī)固定，石蠟包埋。所有蠟塊均行4微米厚度連續(xù)切片，經(jīng)常規(guī)HE染色重新確診分級(jí)后進(jìn)行CyclinD，、p16免疫組化染色。染色步驟(SP法)操作如下：(1)石蠟切片常規(guī)脫蠟入水，(2)3％H。O。室溫孵育，(3)蒸餾水沖洗，PBS浸泡，(4)高壓煮沸修復(fù)抗原，(5)10％正常血清室溫孵育

3、，(6)滴加一抗(工作濃度為CyclinD。1：150，p161：150)，4“C過(guò)夜，(7)滴an抗工作液，37℃孵育，(8)滴加辣根酶標(biāo)記的鏈霉卵白素工作液，37“C孵育，(9)DAB顯色劑顯色，(10)蘇木素復(fù)染，流水返蘭，樹脂明膠封片，(11)在(6)、(7)、(8)步驟后用PBS沖洗3次。同時(shí)設(shè)陽(yáng)性、陰性對(duì)照。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：陽(yáng)性染色為棕黃色顆粒，CyclinD，蛋白表達(dá)位于細(xì)胞核內(nèi)，p16蛋白表達(dá)位于胞漿及胞核內(nèi)。鏡下觀察細(xì)胞