人角質(zhì)形成細胞表達天皰瘡抗原的研究.pdf

1、為了研究培養(yǎng)的人角質(zhì)形成細胞表達天皰瘡抗原的情況,研究人員通過提高培養(yǎng)基中的鈣離子濃度或UVB照射,利用免疫熒光和免疫印跡技術(shù)來檢測人有質(zhì)形成細胞表達抗原的變化.實驗分為三部分:第一、通過改變培養(yǎng)基中的鈣離子濃度,觀察尋常型天皰瘡(PV)和落葉型天皰瘡(PF)抗原出現(xiàn)的時間,從而認識天皰瘡抗原與角質(zhì)形成細胞分化間的關(guān)系.第二、利用不同方法提取表皮總蛋白作為天皰瘡抗原,進行SDS-PAGE和免疫印跡檢測,初步探索出應(yīng)用該方法檢測天皰瘡抗原

2、的條件.第三、應(yīng)用UVB照射培養(yǎng)的角質(zhì)形成細胞,觀察單層細胞有無表達PF抗原,進一步研究有些PF日曬后病情加重,是否與日光引起PF抗原表達相關(guān).結(jié)論:1、單層角質(zhì)形成細胞可以表達PV抗原,而只有復(fù)層化的角質(zhì)形成細胞才能表達出PF抗原.鈣離子可刺激細胞復(fù)層化,并且促進PF抗原的表達,鈣離子濃度愈高,作用時間愈長,PF抗原表達愈明顯.2、三種提取表皮蛋白的方法均可以獲得所需的蛋白質(zhì),中性蛋白酶分離法得到蛋白量最多,免疫印跡技術(shù)是一種敏感特異