痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠模型的制備及防治痛風(fēng)中藥復(fù)方的研究.pdf

1、目的：本課題對痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠模型的制備及關(guān)節(jié)腫脹度檢測方法進行了比較，對未知療效的三種中藥復(fù)方提取物做篩選，對篩選出的最佳中藥復(fù)方提取物JFX-H-50-30作了量效關(guān)系研究，還對其在抑制關(guān)節(jié)炎炎癥反應(yīng)和對高尿酸癥的影響作了研究，為進一步開發(fā)新藥奠定基礎(chǔ)。 方法： (1)采用5％和1.3％兩種不同濃度尿酸鈉注射入大鼠右后足踝的脛跗關(guān)節(jié)腔內(nèi)制備關(guān)節(jié)炎模型并進行對比。 (2)采用5％濃度尿酸鈉制備痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠模

2、型，選用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)為溶劑對照、吲哚美辛和已知有抗炎作用的中藥復(fù)方這兩種測試藥物，對周長、直徑和重量這幾種檢測法的優(yōu)缺點進行比較，確定最佳檢測方法。 (3)以PVP為溶劑對照、吲哚美辛為陽性藥物，對三種中藥復(fù)方提取物 JFX-H-100-60、JFX-H-50-30、JFX-H-50-60進行藥效學(xué)實驗，確定最佳中藥提取物。 (4)以PVP作為溶劑對照，吲哚美辛作為陽性藥物，對中藥復(fù)方提取物JFX-H-50-

3、30的六種給藥劑量0.03 g/kg(每kg體重給藥0.03g，下同)、0.10g/kg、0.30 g/kg、0.50 g/kg、0.75g/kg和1.0 g/kg 作藥效學(xué)研究，并作量效分析。 (5)將家兔分為三組，分別灌胃給以PVP(溶劑對照)、吲哚美辛(陽性對照)，中藥復(fù)方提取物 JFX-H-50-30，采用尿酸鈉注入家兔膝關(guān)節(jié)腔造模，收集關(guān)節(jié)腔積液于顯微鏡下進行白細胞計數(shù)。 (6)將小鼠分成6組，即正常組、高尿酸

4、模型組(PVP溶劑組)、JFX-H-50-30低、中、高劑量組和別嘌呤醇組，除正常組腹腔注射生理鹽水外，其他組均腹腔注射900 mg/kg的氧嗪酸鉀，小鼠眼眶后靜脈叢采血，用全自動生化儀測定血清中尿酸值并進行比較。 結(jié)果： (1)采用濃度為1.3％的尿酸鈉溶液50μl注射，大鼠足踩腫脹度不夠，造模3 h后腫脹自然消退，不穩(wěn)定，而采用5％尿酸鈉50μl注射，足踝腫脹度在造模后1-6 h一直維持在較高水平。 (2)采

5、用直徑法、周長法和重量法對溶劑對照組、吲哚美辛組、中藥復(fù)方組造模后關(guān)節(jié)炎嚴重程度進行測定和比較可知，幾種檢測方法中，從方便性、誤差大小、敏感性、時間過程等各項指標(biāo)綜合考慮，周長法為最佳。 (3)對三種中藥復(fù)方提取物的進行初步篩選發(fā)現(xiàn)，與空白對照組相比，JFX-H-50-30和JFX-H-50-60有非常顯著抗炎作用(P<0.01)，JFX-H-100-60無抗炎作用。進行組問比較發(fā)現(xiàn)，JFX-H-50-30的抗炎作用優(yōu)于JFX-

6、H-50-60(P<0.05)。 (4)中藥提取物JFX-H-50-30的1.0 g/kg劑量、0.75 g/kg劑量、0.50 g/kg劑量均有非常顯著抗炎作用(P<0.01)，0.30 g/kg劑量和0.10 g/kg劑量組有顯著抗炎作用(P<0.05)。0.03 g/kg劑量沒有抗炎作用。中藥復(fù)方JFX-H-50-30在0.10 g/kg～1.0 g/kg劑量范圍有抗炎作用。 (5)家兔關(guān)節(jié)腔積液于顯微鏡下進行白細

7、胞計數(shù)結(jié)果表明，與PVP溶劑對照(模型組)相比，中藥復(fù)方 JFX-H-50-30組的關(guān)節(jié)液中白細胞數(shù)量的影響顯著減少(P<0.05)，說明JFX-H-50-30有抗炎作用。 (6)與模型組比較，中藥復(fù)方低、中、高劑量組均非常顯著地降低高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平(P<0.01，P<0.01，P<0.01)。 結(jié)論： (1)尿酸鈉的不同濃度會影響造模的程度，實驗顯示選用濃度為5％的尿酸鈉注射較為合理。同時，注射體積也

8、會影響足腫脹度，從大鼠足踝脛跗關(guān)節(jié)腔的容積考慮，50μl的注射量較為合理。 (2)檢測足腫脹度的多種方法中，周長法有誤差小、敏感性適中、能反映整體腫脹度和可全程檢測的優(yōu)點，是相對較好的檢測方法。 (3)三種中藥復(fù)方提取物JFX-H-100-60、JFX-H-50-30、JFX-H-50-60中JFX-H-50-30和JFX-H-50-60有抗炎作用，且JFX-H-50-30的抗炎作用優(yōu)于JFX-H-50-60。JFX-H

9、-100-60無抗炎作用。 (4)JFX-H-50-30在0.10g/kg～1.0g/kg 劑量范圍有抗炎作用并存在量效關(guān)系，0.50 g/kg以上劑量的抗炎作用優(yōu)于0.30 g/kg 以下劑量。 (5)JFX-H-50-30能使急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎家兔炎癥關(guān)節(jié)腔積液中白細胞數(shù)量的影響顯著減少 (6)JFX-H-50-30能顯著地降低高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平，并存在一定的量效關(guān)系，JFX-H-50-30劑量越大，降