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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討外源性給予骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Marrow Mesenchymal Stem Cell,MSCs)與CD133+腎臟細(xì)胞對(duì)由缺血再灌注(Ischemia reperfusion,I/R)誘導(dǎo)的急性腎損傷小鼠腎臟的保護(hù)作用。
方法:
1.用Percoll密度梯度離心法結(jié)合貼壁分離法分離出C57BL/6小鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs),備用。用免疫磁珠篩選法結(jié)合貼壁分離法分離出小鼠腎臟間
2、充質(zhì)干細(xì)胞(CD133+腎臟細(xì)胞),備用。
2.雄性C57BL/6小鼠40只,分為正常對(duì)照組、I/R組(夾閉雙側(cè)腎蒂10分鐘后放開動(dòng)脈夾)、I/R+mMSCs組(夾閉雙側(cè)腎蒂10分鐘后立即尾靜脈注射MSCs)、I/R+CD133+腎臟細(xì)胞組(夾閉雙側(cè)腎蒂10分鐘后立即尾靜脈注射CD133+腎臟細(xì)胞),每組10只。在各組模型建立后的第1天、第2天、第3天、第7天、第14天分別處死部分小鼠,每次每組2只。
3.獲
3、取處死小鼠的動(dòng)脈血,檢測(cè)其血尿素氮(BUN)與肌酐(Cr)水平;切取腎組織,制備腎組織切片并行HE染色,觀察腎組織的病理改變,并對(duì)受損腎組織行腎小管壞死程度評(píng)分(ATN評(píng)分)。應(yīng)用酶聯(lián)免疫(ELISA)法檢測(cè)腎組織勻漿中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)的水平。
結(jié)果:
1.I/R+MSCs組術(shù)后BUN、Cr水平、ATN評(píng)分及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平高于正常組(P<0.05),
4、而低于I/R組(以術(shù)后第7天的差異最為顯著(P<0.01))。肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)的檢測(cè)結(jié)果與之相反,I/R+MSCs組術(shù)后肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)水平低于正常組(P<0.05),高于I/R組(以術(shù)后第7天的差異最為顯著(P<0.01))。
2.I/R+ CD133+腎臟細(xì)胞組的術(shù)后BUN、Cr水平、ATN評(píng)分及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平高于正常組(P<0.05),而低于I/R組(以術(shù)后第3天的差異最為顯著(P
5、<0.01))。肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)的檢測(cè)結(jié)果與之相反,I/R+ CD133+腎臟細(xì)胞組術(shù)后肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)水平低于正常組(P<0.05),高于I/R組(以術(shù)后第3天的差異最為顯(P<0.01))。
3.I/R+ CD133+腎臟細(xì)胞組與I/R+MSCs組相比,其術(shù)后BUN、Cr水平、ATN評(píng)分及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平較低,而肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)水平較高,(P<0.05)。
結(jié)論:
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