2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的: 1.建立一種同時(shí)測(cè)定血清中9種結(jié)合型膽汁酸的固相萃取高效液相色譜紫外檢測(cè)法(SPE-HPLC-UV)。 2.用SPE-HPLC-UV法測(cè)定正常孕婦、輕度和重度妊娠肝內(nèi)膽汁淤積癥(ICP)患者母血和臍血中各結(jié)合膽汁酸的濃度,建立ICP的特征膽汁酸譜用于ICP的診斷和分度,初步探討ICP患者母體-胎兒的膽汁酸平衡變化。 方法: 1.用Chromabond C18 ec固相萃取柱萃取血清樣品。

2、2.色譜條件:色譜柱:Waters Nova C18色譜柱(3.9×150 mm,5μm);柱溫:25℃;流速:0.8 ml/min;流動(dòng)相A:60μmol/L磷酸鹽緩沖液(pH3.3),流動(dòng)相B為純甲醇(A:B=34:66,v/v);檢測(cè)波長197 nm;進(jìn)樣量20μl,檢測(cè)時(shí)間20 min。 3.用SPE_HPLC-UV法測(cè)定16例正常孕婦、11例輕度和14例重度ICP患者母血及臍血結(jié)合型膽汁酸。 結(jié)果: 1

3、.9種結(jié)合型膽汁酸在20分鐘內(nèi)分離完全,各膽汁酸在濃度為5~500μmol/L范圍內(nèi)線性良好,r為0.9993~0.9998,具有良好的相關(guān)性;最低檢測(cè)限為1.25~3.13μmol/L;該方法日內(nèi)變異系數(shù)在1.47%~5.95%之間,日間變異系數(shù)在1.61%~7.92%之間,平均回收率在83.11%~101.34%之間。 2.母血:與正常孕婦組的相比:輕度ICP組TCA、TCDCA、TDCA增高有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;重度ICP組TCA

4、、GCA、GLCA、TCDCA和TDCA增高且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與輕度ICP組相比:重度ICP組TCA、GCA、GLCA、TDCA增高有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 臍血:與正常孕婦組相比:重度ICP組TCA、GCA和TDCA增高且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與輕度ICP組相比:重度ICP組TCA、GCA、TDCA增高有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。輕度ICP組的膽汁酸譜與正常孕婦組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論: 1.本研究建立的血清膽汁酸的SPE-HPLC-UV分析

5、法能實(shí)現(xiàn)母血與臍血中結(jié)合型膽汁酸的測(cè)定,該方法準(zhǔn)確、靈敏、快速、特異,適用于實(shí)驗(yàn)室研究和臨床常規(guī)檢測(cè)。 2.本研究建立了輕度和重度ICP患者母血與臍血中的特征膽汁酸譜,該膽汁酸譜有助于ICP的診斷和分度。 3.本研究發(fā)現(xiàn)正常孕婦、輕度和重度ICP母血與臍血中膽汁酸水平成正相關(guān),但正常孕婦臍血中總膽汁酸及TCA、GCA含量高于母血,而ICP患者母血中總膽汁酸及TCA含量卻高于臍血。這些現(xiàn)象可能是由于胎盤對(duì)膽汁酸的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制發(fā)

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