DH001的臨床前藥效學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　痔瘡是一種最常見、最多發(fā)的肛腸疾病,臨床主要表現(xiàn)為出血、疼痛、感染、瘙癢等,痔瘡占所有直腸疾病的87.5％,隨著對該疾病的病因、病理及機制研究的進展,目前非手術(shù)治療已成為早期痔瘡的首選治療方法。而龍血竭為我國的傳統(tǒng)中藥,其性味甘、溫、咸、平,有活血化癖、消腫止痛、收效止血之功效,目前主要以口服形式用于跌打損傷、金瘡出血及心腹卒痛等癥。為了更好地探索龍血竭作為外用藥的藥效學(xué)結(jié)果,也為痔瘡的治療開拓新領(lǐng)域,我們根據(jù)痔瘡的臨

2、床特點和病理過程,從消腫、促潰瘍愈合及抗菌、鎮(zhèn)痛和止血四個方面進行臨床前藥效學(xué)實驗,了解龍血竭栓劑(代號:DH001)的藥效作用。
　　方法和結(jié)果:
　　1.在消腫方面,通過建立巴豆油致大鼠肛門腫脹的動物模型,模擬痔瘡的炎癥反應(yīng)。實驗分為陰性對照組(即正常大鼠組)、模型對照組、陽性對照組(馬應(yīng)龍栓)、DH001低、中、高劑量組共6組。巴豆油造模與直腸給藥同時進行,在給藥6小時后計算直腸肛門腫脹率。結(jié)果表明模型對照組的直腸肛門

3、腫脹率較正常大鼠組明顯增高(P<0.05),說明造模成功;而馬應(yīng)龍組和DH001中、高劑量組的直腸肛門腫脹率較模型對照組有明顯降低(P<0.05);在局部通透性方面,通過測定甲酰胺溶液中染色劑依文思藍的溶出量以及對應(yīng)直腸組織重量,計算每克直腸組織中所含有的依文思藍量,即血管通透性,結(jié)果顯示馬應(yīng)龍組及DH001低、中、高劑量組的通透性較模型組有明顯下降(P<0.05);與馬應(yīng)龍組相比,DH001中、高劑量組對血管通透性的效果較其顯著降低(

4、P<0.05)。
　　2.在促潰瘍愈合和抗菌方面,通過建立化學(xué)性及細(xì)菌性家兔肛門潰瘍的模型,模擬自然感染及特定細(xì)菌感染過程。實驗分為空白組、陽性對照組(馬應(yīng)龍栓)、DH001低、中和高劑量組共5組?；瘜W(xué)性潰瘍模型采用冰醋酸致潰瘍,用千分卡尺測量潰瘍面的最大直徑,計算潰瘍面積。結(jié)果顯示與空白對照組相比,高劑量組在給藥后第一天即能明顯縮小潰瘍的面積(P<0.05),且馬應(yīng)龍組、DH001中、高劑量組均能加速潰瘍的愈合(P<0.05);

5、且DH001高劑量組在愈合時間上更短于馬應(yīng)龍組(P<0.05)。細(xì)菌性模型采用大腸桿菌及金黃色葡萄球菌混合感染,檢驗連續(xù)給藥5天后潰瘍的病理分級,結(jié)果顯示與空白組比較,DH001中、高劑量組及馬應(yīng)龍組大部分動物膿腫已經(jīng)消失,直腸粘膜恢復(fù)正常,僅有少數(shù)動物直腸肌層中可見小團單核細(xì)胞及中性粒細(xì)胞浸潤(P<0.05)。且兩個實驗中,DH001高劑量組改善炎癥的狀況較馬應(yīng)龍組效果均顯著(P<0.05)。
　　3.在鎮(zhèn)痛方面,實驗分空白組、

6、陽性對照組(馬應(yīng)龍栓)、DH001低、中、高劑量組共5組。采用冰醋酸致小鼠扭體實驗,測定小鼠扭體出現(xiàn)時間及15分鐘內(nèi)扭體次數(shù),結(jié)果表明與空白組相比,DH001低、中、高劑量組對小鼠扭體出現(xiàn)時間均無明顯差異(P>0.05),但均能明顯降低小鼠的扭體次數(shù)(P<0.05);另外,采用熱板法測定小鼠第一次舔足出現(xiàn)的時間(即痛閾),結(jié)果顯示,與空白組比較,DH001中、高劑量組及馬應(yīng)龍組的痛閾時間有明顯延長(P<0.05)。但以上兩個實驗中,DH

7、001各組效果均不優(yōu)于馬應(yīng)龍組(P>0.05)。
　　4.在止血方面,實驗分空白組、陽性對照組(馬應(yīng)龍栓)、DH001低、中、高劑量組共5組。采用斷尾法測定出凝血時間及儀器測定血小板計數(shù)。結(jié)果顯示連續(xù)給藥7天后,與空白組相比,DH001中、高劑量組可明顯縮短出凝血時間(P<0.05),且高劑量組的效果更優(yōu)于馬應(yīng)龍組(P<0.05)。另外,DH001中、高劑量組還能增加血小板計數(shù),這也更優(yōu)于馬應(yīng)龍組(P<0.05)。
　　結(jié)論

8、:
　　1.消腫方面,DH001能減輕水腫、降低直腸肛門周圍的通透性;且DH001中、高劑量組對血管通透性的效果更優(yōu)于馬應(yīng)龍組;
　　2.促進潰瘍愈合及抗菌方面,DH001能明顯縮小醋酸所致肛門潰瘍的面積,加快其愈合,同時對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌有明顯抑制作用,且高劑量組的效果顯著于馬應(yīng)龍組;
　　3.鎮(zhèn)痛方面,DH001對醋酸引起的疼痛有抑制作用,能明顯降低小鼠的扭體次數(shù);并且能提高小鼠對熱刺激的耐受性,即痛閾;