腦缺血耐受大鼠VEGF和Ang-1表達(dá)與血管形成的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)部分展開：
　　 第一部分大鼠局灶性預(yù)缺血誘導(dǎo)腦缺血耐受模型的建立
　　 目的：
　　 建立大鼠局灶性腦缺血預(yù)處理(ischemic preconditioning，IP)誘導(dǎo)腦缺血耐受模型，探討該模型的應(yīng)用價(jià)值。
　　 方法：
　　 將99只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分成3組：假手術(shù)組(n=9)，未缺血預(yù)處理組（non-ischemic preconditioning，NIP

2、;n=45），缺血預(yù)處理組(IP，n=45)，后兩組再隨機(jī)分成5個(gè)亞組。線栓法阻塞大腦中動(dòng)脈(middle cerebral arteryocclusion，MCAO)完成局灶性缺血預(yù)處理，缺血預(yù)處理10 min后，分別在缺血預(yù)處理后1，3，7，14，21d進(jìn)行再次缺血2h再灌注22h然后取腦檢查。未缺血預(yù)處理組用假手術(shù)代替預(yù)缺血，在假手術(shù)后按前述不同時(shí)間點(diǎn)給予2h缺血處理，再灌注22h后處死。假手術(shù)組兩次均為假手術(shù)。模型建立后通過神經(jīng)

3、功能評分、TTC染色測定腦梗死體積及細(xì)胞凋亡等對模型進(jìn)行評估。
　　 結(jié)果：
　　 (1)組間比較：與NIP組相比，IP組中的1，3，7d亞組神經(jīng)功能評分及腦梗死體積明顯降低(P　　 (2)組內(nèi)比較：IP組各亞組間神經(jīng)功能評分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；IP組1，3，7d亞組梗死體積較14，21d亞組減小，其中以3d亞組梗死

4、體積減小最為明顯(P<0.05)；IP組以3，7d亞組平均凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)較其他亞組明顯減少(p<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 本研究結(jié)果表明I0min缺血預(yù)處理對大鼠致死性腦缺血產(chǎn)生明顯的保護(hù)作用，即誘導(dǎo)產(chǎn)生腦缺血耐受，線栓法制備腦缺血耐受模型切實(shí)可行。
　　 第二部分腦缺血耐受大鼠VEGF和Ang-1表達(dá)與血管形成的實(shí)驗(yàn)研究
　　 目的：
　　 探討血管內(nèi)皮生長因子(vascular endo

5、thelial growth factor,VEGF)和血管生成素-1(angiopoietin-1，Ang-1)在短暫性腦缺血預(yù)處理誘導(dǎo)腦缺血耐受中的作用及與血管形成的關(guān)系。
　　 方法：
　　 將55只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分成3組：假手術(shù)組(n=5)，未缺血預(yù)處理組(non-ischemic preconditioning，NIP:n=25)，缺血預(yù)處理組(IP，n=25)，后兩組再隨機(jī)分成5個(gè)亞組。線栓法阻

6、塞大腦中動(dòng)脈(middle cerebral arteryocclusion，MCAO)完成局灶性缺血預(yù)處理，缺血預(yù)處理10 min后，分別在缺血預(yù)處理后1，3，7，14，21d進(jìn)行再次缺血2h再灌注22h然后取腦檢查。未缺血預(yù)處理組用假手術(shù)代替預(yù)缺血，在假手術(shù)后按前述不同時(shí)間點(diǎn)給予2h缺血處理，再灌注22h后處死。假手術(shù)組兩次均為假手術(shù)。觀察VEGF、Ang-1及其受體Tie-2蛋白和mRNA及腦微血管密度(MVD)的變化。采用免疫組

7、織化學(xué)方法檢測VEGF、Ang-1、Tie-2及CD34蛋白的表達(dá)，原位雜交法檢測VEGF、Ang-1及Tie-2 Mrna的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 (1)組間比較：與NIP組相比，l，3，7d亞組VEGF、Tie-2蛋白和Mrna表達(dá)明顯增高；7d亞組Ang-1蛋白表達(dá)明顯增高；3，7d亞組MVD表達(dá)、Ang-lmRNA表達(dá)明顯增高。
　　 (2)組內(nèi)比較：IP組7d亞組微血管在缺血灶周邊區(qū)分布最為密集，M