鹽酸洛拉曲克長循環(huán)脂質(zhì)體的制備及其抑瘤特性研究.pdf

1、鹽酸洛拉曲克(NLTX)為胸苷合成酶特異性抑制劑，為新合成的抗腫瘤藥物。鹽酸洛拉曲克存在半衰期較短，靶向性較差的缺點(diǎn)，限制了臨床應(yīng)用。長循環(huán)脂質(zhì)體作為一種新型劑型，具有靶向和緩釋的效果，正好彌補(bǔ)了鹽酸洛拉曲克缺點(diǎn)。本研究進(jìn)行了鹽酸洛拉曲克長循環(huán)脂質(zhì)體(LCL-NLTX)的初步研制，以期提高鹽酸洛拉曲克抗腫瘤活性。 為了提高脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，采用兩親性DSPE-PEG2000、飽和磷脂HSPC及膽固醇為膜材。為提高脂質(zhì)體包封率，采用

2、薄膜擠壓法結(jié)合硫酸銨梯度法制備LCL-NLTX。為控制LCL-NLTX的質(zhì)量，建立了測(cè)定脂質(zhì)體中NLTX的透析法-紫外分光光度法，該方法能準(zhǔn)確測(cè)定脂質(zhì)體中NLTX的含量和脂質(zhì)體的包封率。選定298nm為檢測(cè)波長，制定標(biāo)準(zhǔn)曲線C=31.629A-0.083(r=1.000P＜0.001)。用上述方法測(cè)得LCL-NLTX包封率為68.04％±1.11％。 脂質(zhì)體的穩(wěn)定性研究包括采用激光粒度儀檢測(cè)LCL-NLTX的粒徑大小，用透射電鏡

3、觀察脂質(zhì)體的形態(tài)，行體外釋藥試驗(yàn)及考察脂質(zhì)體經(jīng)濾過消毒后滲漏率。將脂質(zhì)體于4、20、40℃條件下避光密閉放置1、15、30、60及90天，對(duì)其外觀、粒徑大小和包封率進(jìn)行考察，評(píng)價(jià)脂質(zhì)體制劑的穩(wěn)定性。結(jié)果顯示，脂質(zhì)體粒徑平均值為109.3nm，分散度為0.14；透射電鏡圖片顯示脂質(zhì)體外觀圓整，粒徑規(guī)一；除在4℃，粒徑、包封率無變化外，其他條件下隨著溫度升高及時(shí)間延長，LCL-NLTX的粒徑變大、包封率下降。故認(rèn)為LCL-NLTX必須低溫儲(chǔ)

4、存。在PBS和人血漿兩種介質(zhì)中行體外釋藥試驗(yàn)，結(jié)果顯示LCL-NLTX無論在PBS和人血漿中均有較好的穩(wěn)定性。LCL-NLTX經(jīng)0.22μm濾膜濾過消毒后滲漏率基本控制在2％以內(nèi)，基本能滿足實(shí)驗(yàn)需要。 體外抑瘤試驗(yàn)采用MTT法檢測(cè)CL-NLTX、LCL-NLTX對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2的2h及48h生長抑制率，并推算各自IC50。結(jié)果顯示在2h三組均有非常顯著性差異，P＜0.001；在48h顯示F-NLTX與另兩組有顯著性差異，

5、P＜0.05。推測(cè)是由于脂質(zhì)體尤其是長循環(huán)脂質(zhì)體的緩釋性所致。 體內(nèi)抑瘤試驗(yàn)采用動(dòng)物移植性腫瘤實(shí)驗(yàn)法，用H22小鼠肝癌細(xì)胞接種于昆明小鼠后肢右腋皮下形成實(shí)體瘤，考察LCL-NLTX、CL-NLTX和F-NLTX給藥后對(duì)實(shí)體瘤的瘤重抑制率及腫瘤體積變化。結(jié)果顯示CL-NLTX、LCL-NLTX均具有抗腫瘤效應(yīng)；LCL-NLTX較F-NLTX及CL-NLTX短時(shí)間內(nèi)抑瘤性較差，而長時(shí)間則顯較強(qiáng)的抑瘤性，其瘤重抑制率為41.86％，顯