神經(jīng)因素對缺血肢體血管生成和骨骼肌纖維重塑影響的研究.pdf

1、目的:(1)構(gòu)建小鼠后肢缺血模型，并在此基礎(chǔ)上去除坐骨神經(jīng)支配，觀察神經(jīng)因素對缺血肢體VEGF表達、代償性血管生成和骨骼肌纖維類型變化的影響。(2)對小鼠后肢缺血模型進行NGF和VEGF基因轉(zhuǎn)染，評價NGF在缺血肢體血管生成和骨骼肌纖維重塑中的作用，探討NGF與VEGF在血管生成和骨骼肌纖維重塑中的關(guān)系。
　　方法:(1)建立單純后肢缺血模型和后肢缺血+去神經(jīng)支配模型，術(shù)后對患肢腓腸肌進行重量測定，并對標本進行HE染色，CD31和

2、PCNA免疫組化染色，肌球蛋白ATP酶染色，ELISA檢測NGF和VEGF表達量。(2)對小鼠后肢缺血模型進行NGF和VEGF-ATF基因轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染后對缺血肢體功能進行評估，測定患肢腓腸肌重量，并取腓腸肌組織進行HE染色、PCNA和CD31免疫組化染色，肌球蛋白ATP酶染色，ELISA檢測NGF、VEGF表達量。
　　結(jié)果:(1)術(shù)后第7天，缺血+去神經(jīng)支配組的患肢缺血程度評估1～4級的比例高于單純?nèi)毖M，而0級的比例低于單純?nèi)毖?/p>

3、組，兩組總體差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與正常對照組相比，單純?nèi)毖M和缺血+去神經(jīng)支配組小鼠的腓腸肌萎縮明顯，其相對肌肉重量均顯著降低，且缺血+去神經(jīng)支配組比單純?nèi)毖M降低更明顯(P＜0.05)。術(shù)后第28天，缺血+去神經(jīng)支配組與單純?nèi)毖M相比，其內(nèi)皮細胞增殖指數(shù)、毛細血管密度、NGF和VEGF表達量均明顯降低(P＜0.05);術(shù)后第28天，缺血+去神經(jīng)支配組的腓腸肌Ⅱ型肌纖維比例明顯高于單純?nèi)毖M(P＜0.05)。(2)術(shù)后第2

4、8天，NGF組和VEGF組的患肢功能評分和肌肉萎縮程度明顯低于空白對照組和正常對照組;與正常對照組相比，空白對照組、NGF組和VEGF組小鼠的腓腸肌重量均出現(xiàn)不同程度的降低，但是NGF組和VEGF組的相對肌肉重量明顯高于空白對照組（P＜0.05）;NGF組和VEGF組的內(nèi)皮細胞增殖指數(shù)、毛細血管密度均明顯高于空白對照組和正常對照組(P＜0.05); NGF組的NGF和VEGF表達量明顯高于空白對照組(P＜0.05); VEGF組的VEG

5、F表達量明顯高于空白對照組(P＜0.05)，但其NGF表達量與空白對照組相比無明顯升高(P＞0.05)，與NGF組相比明顯降低(P＜0.05);NGF組和VEGF組Ⅰ型肌纖維比例明顯高于空白對照組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:(1)神經(jīng)因素在維持缺血肢體VEGF表達量和代償性血管生成，減輕組織缺血程度和維持骨骼肌纖維類型上具有重要作用。(2) NGF基因轉(zhuǎn)染能夠誘導(dǎo)缺血肢體表達NGF和VEGF蛋白，從而促進新生血管形成，并且NGF