MMP-9 C-1562T基因多態(tài)性和急性冠脈綜合征關(guān)系的研究.pdf

1、背景: ACS(acute coronary syndrome)通常是由動脈粥樣硬化斑塊破裂導(dǎo)致冠脈內(nèi)血栓形成和閉塞所引起。動脈粥樣硬化(Atherosclerosis簡稱AS)是指發(fā)生在大、中動脈內(nèi)膜、內(nèi)膜下，以脂質(zhì)沉著(主要是膽固醇及膽固醇醋)，并伴有中層平滑肌細(xì)胞向內(nèi)膜移行、增殖，內(nèi)膜增厚發(fā)展而形成粥樣病灶或纖維脂質(zhì)斑塊的病變。AS是一個穩(wěn)定期與不穩(wěn)定期交替的非線性過程，這一過程取決于斑塊的穩(wěn)定性。目前認(rèn)為不穩(wěn)定斑塊含有大

2、的脂質(zhì)核，當(dāng)脂質(zhì)核占斑塊的比率>40％時，斑塊有破裂的危險；脂核成分決定了斑塊的堅固性，以液態(tài)膽固醇脂為主的脂核較以晶體狀膽固醇為主的脂核軟，在周向應(yīng)力作用下更易破裂。纖維帽變薄，且存在較高應(yīng)力作用于斑塊肩部時，斑塊破裂就將發(fā)生。目前研究認(rèn)為，動脈粥樣硬化炎性反應(yīng)可發(fā)生于全身動脈系統(tǒng)。炎癥反應(yīng)時，由于炎性細(xì)胞可釋放降解基質(zhì)的物質(zhì)(如基質(zhì)金屬蛋白酶等)，使纖維帽變薄，可促使斑塊的破裂。已知基質(zhì)降解是冠狀動脈粥樣硬化發(fā)展過程中單核細(xì)胞與VS

3、cMs遷移的必要條件。但細(xì)胞外基質(zhì)的過度降解使斑塊易于破裂導(dǎo)致急性冠脈綜合征的發(fā)生。冠狀動脈斑塊破裂常發(fā)生在斑塊的肩部區(qū)域?；|(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinases，MMPs)通過消化纖維帽成分破壞其結(jié)構(gòu)，造成斑塊不穩(wěn)定。最近的研究結(jié)果已揭示出在斑塊破裂區(qū)域基質(zhì)金屬蛋白酶家族中MMP-9表達明顯增強。ACS患者MMP-9外周循環(huán)血水平升高。 MMPs作為降解細(xì)胞外基質(zhì)的主要蛋白酶，其與急性冠脈綜合征的關(guān)系

4、近年來漸成為熱點。 目的：用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片斷長度多態(tài)性分析法探討基質(zhì)金屬蛋白酶-9啟動子C-1562T多態(tài)性與急性冠脈綜合征發(fā)病以及病變嚴(yán)重程度的關(guān)系。比較MMP-9基因啟動子C-1562T基因型與等位基因頻率在ACS病人及正常人之間差異，并探討此多態(tài)性與冠脈病變支數(shù)的關(guān)系。 方法: 1、DNA模板的制備所有研究對象均禁食12-14h后，于次日清晨肘靜脈采血，檸檬酸鈉抗凝，分離血漿和白細(xì)胞，血漿-20℃凍

5、存，白細(xì)胞層提取基因組DNA，提取采用酚-氯仿法。 2、PCR擴增MMP-9 C-1562T位點及其側(cè)翼區(qū)。 3、酶切反應(yīng)。產(chǎn)物經(jīng)1.5％瓊脂糖凝膠電泳后，EB染色，凝膠成像系統(tǒng)判定結(jié)果。 4、統(tǒng)計結(jié)果。采用SPSS13.0軟件進行數(shù)據(jù)處理。比較MMP-9基因啟動子C-1562T基因型與等位基因頻率在ACS病人及正常人之間差異，并探討此多態(tài)性與冠脈病變支數(shù)的關(guān)系。 結(jié)論: 1、 MMP-9基因C-