醒腦靜對A型肝性腦病大鼠肝功能、內(nèi)毒素及GS、NOS表達(dá)影響的研究.pdf

1、研究背景與目的：
　　目前肝性腦病發(fā)生機理尚未完全明了，治療也無特效療法，危害極大，長期以來一直是國內(nèi)外中西醫(yī)研究的對象。A型肝性腦（Aepatic Encephalopathy of Type A，AHE)病死率高達(dá)80％以上，為臨床較為常見的急危重癥。醒腦靜注射液能縮短肝性腦病昏迷時間，促進(jìn)清醒，有明確的臨床療效。但現(xiàn)有臨床療效觀察資料非常有限，且入選病例較少，缺乏有力的臨床數(shù)據(jù)支持醒腦靜用于治療AHE。
　　本研究探討

2、300mg·kg-1·d-1的硫代乙酰胺（Thioacetamide，TAA）誘導(dǎo)大鼠A型肝性腦病的造模最適時間；探討醒腦靜對A型肝性腦病大鼠肝功能、內(nèi)毒素及谷氨酰胺合成酶（Glutamine Synthetase，GS）、一氧化氮合酶（Nitric Oxide Synthase，NOS）表達(dá)的影響。為醒腦靜治療A型肝性腦病提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法:
　　1探討TAA（300mg·kg-1·d-1）誘導(dǎo)大鼠A型肝性腦病的造模

3、最適時間：
　　(1)將60只大鼠分為A、B、C、D四組，其中A組為正常對照組，用同實驗組用藥量相等的生理鹽水灌胃4天。B、C、D三組為實驗組，分別用 TAA（300mg·kg-1·d-1）連續(xù)灌胃2天、3天和4天。
　　(2)比較各組大鼠行為學(xué)變化、大鼠 AHE的誘導(dǎo)率和致死率；分析各組給藥結(jié)束24小時后血氨、谷草轉(zhuǎn)氨酶(Glutamic Oxalacetic Transaminase，AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Glutami

4、c-Pyruvic Transaminase，ALT)、總膽紅素(Total Bilirubin，TBIL)的差異；比較各組肝組織形態(tài)學(xué)變化。
　　2探討醒腦靜對A型肝性腦病大鼠肝功能、內(nèi)毒素及GS、NOS表達(dá)的影響：
　　(1)將60只大鼠分為A、B、C、D、E、F六組，其中A組為正常對照組；
　　B組為A型肝性腦病模型組；C、D、E、F組為治療組，即分別給予已建立 A型肝性腦病模型的大鼠醒腦靜（2.5ml·kg-1

5、·d-1）、醒腦靜（5ml·kg-1·d-1）、醒腦靜（10ml·kg-1·d-1）、門冬氨酸鳥氨酸（2g·kg-1·d-1）治療5天。
　　(2)比較各組大鼠行為學(xué)變化、AST、ALT、TBIL的差異；比較各組大鼠肝組織形態(tài)學(xué)變化；檢測分析各組INF-α、內(nèi)毒素及GS、NOS表達(dá)量的差異。
　　結(jié)果：
　　1 TAA（300mg·kg-1·d-1）誘導(dǎo)大鼠A型肝性腦病的造模最適時間：
　　(1) B、C、D實驗

6、組較A組正常組大鼠腦功能分級高（P<0.0083)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；C、D組較B組大鼠腦功能評分高（P<0.0083)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(2) A組正常組，無AHE誘導(dǎo)大鼠也無死亡大鼠；C、D組較B組誘導(dǎo)率高（P<0.0083），差異有統(tǒng)計學(xué)意義；D組較B、C組的大鼠致死率高（P<0.0083)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(3) B、C、D實驗組大鼠血氨、AST、ALT、TBIL均顯著高于A組正常組（P<0.05)，

7、差異有統(tǒng)計學(xué)意義；C、D組血氨、AST、ALT、TBIL均較B組高（P<0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(4) A組大鼠肝組織形態(tài)正常；C、D組肝組織學(xué)觀察炎癥侵潤、壞死、纖維化等損害較明顯。
　　2探討醒腦靜對A型肝性腦病大鼠肝功能、內(nèi)毒素及GS、NOS表達(dá)的影響：(1) A組正常組大鼠無行為學(xué)改變；C、D、E、F用藥組大鼠行為學(xué)改變和腦功能分級均較B組低（P<0.0033)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(2) B、

8、C、 D、E、F組大鼠血氨、AST、ALT、TBIL均較A組正常組高（P<0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；C、 D、E、F組大鼠血氨、AST、ALT、TBIL均較B組有不同程度的降低（P<0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義；E組血氨較C組低（P<0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(3) A組大鼠肝組織形態(tài)正常；E組肝組織形態(tài)變化較C、D、F組輕，為少量炎癥侵潤，有點狀及少量灶狀壞死，部分肝細(xì)胞腫脹.。
　　(4) B、C、D、E、

9、F組均較A組正常組大鼠INF-α和內(nèi)毒素濃度高（P<0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義；E組INF-α和內(nèi)毒素濃度均低于C、 D組（P<0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(5) B、C、D、E、F組均較A組正常組大鼠GS、NOS表達(dá)量低（P<0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義；E組較C、D組GS表達(dá)量較低（P<0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義；C、D、E、F組GS、NOS表達(dá)量均較B組低（P<0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義；D、E、F組較C組NO

10、S表達(dá)量低（P<0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　1300mg·kg-1·d-1的TAA連續(xù)灌胃3天為誘導(dǎo)大鼠急性肝性腦病適宜時間。大鼠行為學(xué)改變顯著、肝功能損害大、肝組織壞死較嚴(yán)重、有較高誘導(dǎo)率及較低致死率。
　　2A型肝性腦病大鼠通過醒腦靜注射液或門冬氨酸鳥氨酸注射液治療，可改善大鼠行為學(xué)變化及肝功能，減少肝細(xì)胞炎癥侵潤及壞死，降低細(xì)胞炎癥，降低血液中內(nèi)毒素和INF-α水平，降低腦內(nèi)GS和NOS的表達(dá)