腫瘤基因治療新策略-端粒酶核酶擇時治療腫瘤研究.pdf

1、四川大學(xué)博士學(xué)位論文腫瘤基因治療新策略:端粒酶核酶擇時治療腫瘤研究姓名：屈藝申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生物醫(yī)學(xué)工程指導(dǎo)教師：王正榮20030420轉(zhuǎn)錄酶mRNA；在細胞內(nèi)能明顯抑制端粒酶活性，使其降至對照細胞的50％一25％。并使細胞生長變慢，倍增時間延長。3設(shè)計合成了針對端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶mRNA5’端區(qū)的錘頭狀核酶hTERT一5’RZ基因，并將該基因重組入pcDNA31(十)，經(jīng)體外轉(zhuǎn)錄得到小片段hTERT5’RZ。用脂質(zhì)體介導(dǎo)法，將hT

2、ERT一5’RZ導(dǎo)入Hela細胞以檢測其對Hela細胞端粒酶活性的抑制效力。同時比較了同法合成的針對端粒酶RNA模板的核酶(teloRZ)和二種核酶混合物對Hela細胞端粒酶活性的抑制效力。結(jié)果，小片段hTERT5’RZ能有效抑制Hela細胞端粒酶活性，且其抑制效力較單純teloRZ為高，二種核酶混合物的端粒酶抑制效力與hTERT5’RZ相當(dāng)，也高于單純teloRZ。提示，小片段核酶hTERT一5’RZ可望成為優(yōu)于teloRZ的端粒酶抑

3、制劑，在腫瘤基因治療中發(fā)揮作用。4為探討肝癌裸鼠移植瘤細胞DNA合成與端粒酶表達的生物節(jié)律。在時辰同步化裸鼠中構(gòu)建肝癌細胞SMMC7721裸鼠移植瘤，繼續(xù)在程控光照條件下飼養(yǎng)，于光照后3，6，9，12，15，18，21小時取樣，用流式細胞儀測定各時期細胞DNA含量，細胞周期分布及端粒酶活性水平。結(jié)果，肝癌裸鼠移植瘤細胞DNA合成隨晝夜節(jié)律變化。且伴隨端粒酶活性的同步節(jié)律變化，節(jié)律周期呈余弦分布。表明，肝癌裸鼠移植瘤的生長與端粒酶活性表達