虹膜血管緊密連接變化與角膜移植免疫排斥關系的實驗研究.pdf

1、目的:研究虹膜血管緊密連接的變化與角膜移植免疫排斥反應之間的關系，進一步揭示角膜移植免疫排斥反應的發(fā)生機理。方法以C57BL/6小鼠為供體，BALB/c小鼠為受體，制作穿透性角膜移植模型40只。其中20只前房植入環(huán)孢素A緩釋系統(tǒng)(CSA-DDS)；為B組，余為A組。應用虹膜鋪片技術、免疫組化技術及分子生物學檢查，檢測不同時間虹膜血管CD31、緊密連接蛋白Z0-1、occludin及金屬基質(zhì)蛋白酶9(MMP-9)的變化。 結果:虹

2、膜鋪片免疫熒光顯示：A組術后7天可見CD31陽性血管密度增加，管腔明顯增粗；B組術后18天，虹膜血管管腔變粗；排斥時兩組虹膜血管管腔均較正常粗，走形僵直。眼球冰凍切片示：A組術后7天，B組術后18天小鼠虹膜緊密連接蛋白Z0-1表達無明顯變化，MMP-9表達明顯增加；排斥時Z0-1的表達較正常減少，MMP-9表達明顯增加。RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)：A組術后3、7、12、18天MMP-9表達均高于正常；B組3天時表達明顯增多后急劇下降，但18天

3、時又高于正常。A組術后3天occludin表達一過性增加，之后逐漸下降，至18天達最低，B組呈緩慢的下降趨勢。A組術后3天、12天Z0-1表達明顯增多，7天、18天時表達較正常明顯下降。B組3天明顯高于正常，之后逐漸下降，18天時表達與正常無明顯差別。 結論:角膜移植免疫排斥反應發(fā)生時iris angioedema andcoarsen虹膜血管水腫，管腔變粗，緊密連接蛋白ZO-1、occludin表達減少，前房植入CSA可延緩這