大鼠嚴重?zé)齻蠼Y(jié)腸平滑肌及其小動脈血管平滑肌細胞表型轉(zhuǎn)化的實驗研究.pdf

1、多器官功能障礙綜合征 (Multiple Organ Dysfunction Syndrome，MODS) 是嚴重?zé)齻饕劳鲈蛑唬F(xiàn)已證實缺血缺氧是導(dǎo)致嚴重?zé)齻嗯K器損害的主要始動因素之一，腸道是對缺血、缺氧損害最為敏感的器官之一，缺血缺氧導(dǎo)致細胞氧利用及能量代謝障礙，并可進一步導(dǎo)致失控性炎癥反應(yīng)，最后導(dǎo)致細胞功能的廣泛損害，使之產(chǎn)生凋亡或死亡。且嚴重?zé)齻?，由于腸粘膜屏障損害、免疫功能抑制和腸道菌群紊亂，腸道中的細菌和內(nèi)毒素可通

2、過受損的腸粘膜屏障侵入到體循環(huán)和其它臟器，形成腸源性感染。進一步發(fā)展可成為全身炎癥反應(yīng)綜合征(SystemicInflammatory Response Syndrome，SIRS)乃至MODS的始動因素。目前，燒傷后臟器早期損害的防治研究主要集中于對減輕燒傷早期腸粘膜損害，保護腸粘膜屏障功能的探討，其關(guān)鍵問題是盡快恢復(fù)受損的組織細胞的功能，對嚴重?zé)齻皺C體應(yīng)激反應(yīng)過程中腸道本身的結(jié)構(gòu)和功能改變的研究也逐漸重視起來。 機體在正常

3、情況下，循環(huán)血流的30％流經(jīng)胃腸道。當機體受到嚴重?zé)齻踔涟l(fā)生休克時，全身血液重新分配，胃腸道血流明顯減少，最早發(fā)生缺血缺氧，腸絨毛發(fā)生缺血性損害，上皮細胞水腫壞死，腸通透性增加，發(fā)生細菌毒素移位，產(chǎn)生腸源性感染。嚴重?zé)齻瑫r導(dǎo)致胃腸運動障礙，早期胃排空及腸道推進功能明顯下降，胃腸道及其血管平滑肌是胃腸動力的基礎(chǔ)和源泉，胃腸平滑肌節(jié)律性的收縮、舒張維持胃腸道消化吸收營養(yǎng)物質(zhì)、排泄廢物等正常生理功能。血管平滑肌細胞與血管的結(jié)構(gòu)及功能變化密

4、切相關(guān)，關(guān)于嚴重?zé)齻笪改c道及其血管平滑肌的變化規(guī)律，目前尚不明確，本課題擬通過燒傷大鼠模型，研究嚴重?zé)齻笪改c運動功能的改變和腸道平滑肌細胞及其粘膜下小動脈血管平滑肌細胞表型轉(zhuǎn)化的變化規(guī)律。旨在探討腸道平滑肌及其粘膜下小動脈血管平滑肌肌動蛋白在燒傷后胃腸運動變化中的作用，為進一步研究改善燒傷后胃腸運動功能，防治腸源性感染提供一個新的思路。 一、材料與方法: 1．采用大鼠Ⅲ°30％TBSA燒傷模型，檢測傷后1、2、6、1

5、2、24、48、72h不同時相點炭末膠液灌胃后的炭末推進率，了解燒傷后胃腸運動功能的變化情況。 2．采用大鼠Ⅲ°30％TBSA燒傷模型，取材傷后1、2、6、12、24、48、72h不同時相點結(jié)腸標本，采用免疫組化方法檢測結(jié)腸平滑肌肌動蛋白的表達。 3．采用大鼠Ⅲ°30％TBSA燒傷模型，取材傷后1、2、6、12、24、48、72h不同時相點結(jié)腸標本，采用免疫組化方法檢測結(jié)腸粘膜下小動脈血管平滑肌肌動蛋白的表達。

6、二、主要結(jié)果: 1．大鼠Ⅲ°30％TBSA燒傷模型，傷后1、2、6、12、24、48、72h不同時相點，炭末膠液灌胃后的炭末推進率分別為72.81％、54.11％、38.52％、47.32％、40.01％、45.86％、42.46％，正常對照組炭末推進率74.20％。 2．大鼠Ⅲ°30％TBSA燒傷模型，傷后1、2、6、12、24、48、72h不同時相點，取材大鼠近回盲部結(jié)腸組織，包埋切片，采用SABC法免疫組化技術(shù)檢測

7、腸壁組織平滑肌肌動蛋白的表達。傷后2h粘膜下肌層平滑肌肌動蛋白的表達下降，傷后6h表達最低(PU值5.335)，傷后12h-24h平滑肌肌動蛋白的表達上升，傷后48h平滑肌肌動蛋白的表達再次下降，傷后72h平滑肌肌動蛋白的表達再次上升。而腸壁組織平滑肌肌動蛋白的表達變化略小，同樣呈先降低后升高，再降低又升高，表達最低在傷后48h(PU值2.755)。 3．大鼠Ⅲ°30％TBSA燒傷模型，傷后1、2、6、12、24、48、72h不

8、同時相點，取材大鼠近回盲部結(jié)腸組織，包埋切片，采用SABC法免疫組化技術(shù)檢測粘膜下小動脈血管平滑肌肌動蛋白的表達。其表達在傷后2h開始升高，傷后12h最高(PU值9.84)，并持續(xù)到傷后24h，傷后48h血管平滑肌肌動蛋白的表達降至(PU值4.005)最低伴隨血管平滑肌內(nèi)膜下增生，傷后72h血管平滑肌肌動蛋白的表達再次升高。 三、結(jié)論: 1．大鼠燒傷后炭末膠液灌胃后的炭末推進率較正常對照組炭末推進率明顯降低，傷后6小時起

9、尤為明顯，傷后72小時仍未見恢復(fù)跡象，表明燒傷后胃腸運動功能受到明顯抑制。 2．大鼠燒傷后腸壁及粘膜下肌層平滑肌肌動蛋白的表達先降后升再降又升，平滑肌由收縮表型轉(zhuǎn)化為合成表型，并相互轉(zhuǎn)化，使平滑肌組織正常的收縮功能降低恢復(fù)又降低再恢復(fù)。 3．大鼠燒傷后24小時內(nèi)，血管平滑肌肌動蛋白的表達先升高，血管平滑肌收縮，血管管腔變窄，傷后48小時血管平滑肌肌動蛋白的表達降至最低，然后再次升高。 根據(jù)上述結(jié)果，作出以下結(jié)論或