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文檔簡介
1、Fas(Apo-1/CD95)是廣泛存在于正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞表面的I型跨膜蛋白,基因定位10q24.1。成熟的FasL(Fas Ligand,F(xiàn)as的天然配體)屬于Ⅱ型膜蛋白,分子量為40KD。FasL基因位于1q23,都屬于腫瘤壞死因子家族的受體和配體。Fas系統(tǒng)功如果被激活能使易感細(xì)胞正常凋亡。Fas\FasL系統(tǒng)能夠與具有細(xì)胞毒性T的細(xì)胞相互影響維持免疫反應(yīng)膜的穩(wěn)定和內(nèi)環(huán)境平衡。Fas系統(tǒng)也能介導(dǎo)T細(xì)胞引起的細(xì)胞凋亡。然而最近的報
2、道,對腫瘤細(xì)胞FasL表達(dá)的干擾能夠影響腫瘤細(xì)胞在人體內(nèi)的正常凋亡。 因此研究胃癌發(fā)生、發(fā)展、侵襲的相關(guān)因素,針對其中的某些環(huán)節(jié)施加影響可能成為胃癌治療的新策略。進(jìn)一步研究PTEN、Fas\FasL和MMP-2在胃癌組織中的表達(dá)探討其臨床意義,為其在腫瘤預(yù)防和臨床診斷治療的應(yīng)用上提供依據(jù)。 目的: 研究在人體胃癌組織PTEN、Fas\FasL,并IMMP-2表達(dá)及其與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系;探討PTEN、Fas\F
3、asL和MMP-2對胃癌細(xì)胞增殖和侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響;初步探討PTEN、Fas\FasL和MMP-2在腫瘤發(fā)生和增殖中的作用。為探索PTEN、Fas\FasL和MMP-2配體藥物應(yīng)用于胃癌的預(yù)防和臨床治療提供一些理論依據(jù)。 研究材料和方法: 研究對象:選擇臨床及病理資料齊全的中國醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院普通外科2001年~2005年手術(shù)切除并經(jīng)病理證實為胃癌的蠟塊標(biāo)本75例,全部病例術(shù)前均未進(jìn)行過化療或放療,病理均為腺癌。其
4、中男54(72%)例,女21(28%)例;年齡38~78歲,平均59.6歲;腫瘤的原發(fā)灶大小、深度(T)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(N)由病理科確定,遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(M)由病理學(xué)和臨床確定。組織學(xué)分型:高分化19例,中分化3l例,低分化25例;局部淋巴轉(zhuǎn)移:無轉(zhuǎn)移34例,有轉(zhuǎn)移41例。根據(jù)1997年國際抗癌聯(lián)盟(UICC)制定的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床分期,Ⅰ期11例,Ⅱ期31例,Ⅲ期19例,Ⅳ期14例。另取正常胃粘膜組15例做對照,標(biāo)本取自胃潰瘍或十二指腸
5、潰瘍手術(shù)標(biāo)本中正常胃粘膜組織,并經(jīng)病理觀察證實且排除重度不典型增生。其中男10例,女5例,年齡44~77歲,平均年齡58歲。 主要試劑:鼠抗人MMP-2單克隆抗體購自美國NEOMARKERS公司,工作濃度1:700;鼠抗人PTEN單克隆抗體購自北京中山生物技術(shù)有限公司,工作濃度1:75; Fas\FasL IgG(Santa Cruz Biotechnology,Santa Cruz,CA,USA)超敏SP試劑盒和DAB
6、顯色劑均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。免疫組織化學(xué)染色所需的常規(guī)試劑:枸櫞酸鹽緩沖液(0.01M PH6.0)、磷酸氫二鈉、氯化鈉、二甲苯、酒精、過氧化氫、蘇木素等。 主要器材:普通實驗室冰箱、切片機(jī)、烤片機(jī)、高壓鍋、溫育箱、濕盒、恒溫振蕩器、OlympusBX41顯微鏡、顯微數(shù)碼照相機(jī)OlympusBX40F4等,均由中國醫(yī)科大學(xué)附屬二院病理科提供。 全部數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理。胃癌PTEN、Fas\Fa
7、sL和OMMP-2的表達(dá)與有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的差異用X2檢驗,P值<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果: 1、MMP-2的陽性表達(dá)率與胃癌的浸潤深度、淋巴轉(zhuǎn)移、臨床分期呈正相關(guān)(P<0.05),隨腫瘤浸潤深度的加深、淋巴轉(zhuǎn)移的產(chǎn)生、臨床分期的提高而明顯增高;與腫瘤的病理分化程度呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),其陽性表達(dá)率隨著腫瘤病理分化程度的降低而增高。 2、PTEN、Fas\FasL的陽性表達(dá)率與胃癌的浸潤深度、淋巴轉(zhuǎn)移
8、、臨床分期呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),隨腫瘤浸潤深度的加深、淋巴轉(zhuǎn)移的產(chǎn)生、臨床分期的提高而明顯降低;與腫瘤的病理分化程度呈正相關(guān)(P<0.05),其陽性表達(dá)率隨著腫瘤病理分化程度的降低而降低。 3、Spearman等級相關(guān)分析顯示,PTEN和Fas\FasL表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.401,P<0.05)。MMP-2與PTEN、Fas\FasL表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。 結(jié)論: 1、胃癌組織中MMP-2與PTEN、Fas\Fas
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