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1、目的:觀察草魚膽汁及鯉醇硫酸酯鈉致人腎近曲小管上皮細胞(HK-2)的死亡方式及早期藥物干預后HK-2細胞變化情況,為臨床救治魚膽中毒患者,降低病死率提供理論依據(jù)。 方法:首先根據(jù)文獻報道方法從草魚膽汁中提取鯉醇硫酸酯鈉,通過體外培養(yǎng)HK-2細胞系,應用MTT法評價草魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉對HK-2細胞增殖抑制作用,及不同濃度的丹參、水飛薊賓、氨氯地平和ATP對草魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉中毒的HK-2細胞的干預效果;應用流式細胞術(shù)檢測草
2、魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉所致的HK-2細胞的主要死亡方式。 結(jié)果:(1)HK-2細胞存活率隨著草魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉濃度的增加和時間的延長而降低,且草魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉對HK-2細胞的影響無明顯差異:(2)對應濃度的草魚膽汁(4μl/ml)和鯉醇硫酸酯鈉(266.8μg/ml)染毒HK-2細胞24h后,細胞存活率均隨著丹參濃度的增加而顯著增加(P<0.01),而且兩者無差異;但在地塞米松、水飛薊賓、氨氯地平和ATP干預組,細胞存活
3、率無明顯增加(P>0.05);(3)系列濃度的草魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉染毒HK-2細胞24h后,細胞凋亡和脹亡均明顯增多,草魚膽汁(2、4μl/ml)和鯉醇硫酸酯鈉(66.7、133.4μg/ml)時HK-2細胞主要呈現(xiàn)凋亡樣壞死;而草魚膽汁(8μg/ml)和鯉醇硫酸酯鈉(533.6μg/ml)時HK-2細胞主要呈現(xiàn)脹亡樣壞死。 結(jié)論:1.小劑量的草魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉主要導致HK-2細胞呈現(xiàn)凋亡樣壞死;大劑量的草魚膽汁和鯉醇硫酸
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