HBV感染：宿主CD8+ T淋巴細(xì)胞應(yīng)答與臨床轉(zhuǎn)歸.pdf

1、[目的]：研究HBV感染后不同臨床轉(zhuǎn)歸的人群之間細(xì)胞免疫狀態(tài)的差異，探討慢性HBV感染的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制。 [方法]：從2006年10月至2008年4月就診于北京協(xié)和醫(yī)院肝炎門診及秦皇島市第三醫(yī)院感染科門診的患者中選取13名慢性乙型肝炎患者、10名慢性HBV攜帶者、10名非活動(dòng)性HBsAg攜帶者，并篩選了13名亞臨床HBV感染康復(fù)者和3例健康人對(duì)照。使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD8+T淋巴細(xì)胞CCR7/CD27亞群、流式細(xì)胞儀檢測(cè)非特異性

2、CD8+T細(xì)胞應(yīng)答水平以及HBcAg特異性CD8+T細(xì)胞應(yīng)答水平。我們自行設(shè)計(jì)了HBcAg肽段庫作為CD8+T細(xì)胞的特異性刺激原。該肽段庫共包含35條肽段，按肽段序列先后分別組成C1-C12、C13-C24、C25-C35三個(gè)肽段池。使用PMA+Ionomycin作為非特異性刺激原。 [結(jié)果]： 1.慢性乙肝患者組外周血CD8+CCR7-CD27-T細(xì)胞比例為57.1％±20.5％，顯著高于慢性HBV攜帶者組、非活動(dòng)性H

3、BsAg攜帶者組和HBV康復(fù)者組；慢性乙肝患者組CDS+CCR7+CD27+T細(xì)胞比例為23.1％±14.6％，顯著低于其他慢性HBV感染組及HBV康復(fù)者組。 2.PMA+Ionomycin刺激20小時(shí)后，慢性乙型肝炎患者組、慢性HBV攜帶者組及非活動(dòng)性HBsAg攜帶者組中INF-γ陽性的CD8+T淋巴細(xì)胞比例分別為12.405％(7.716％，17.320％)、12.850％(7.042％，23.007％)及20.333％(1

4、5.345％，29.698％)；非活動(dòng)性HBsAg攜帶者組CDS+CCR7-CD27+T細(xì)胞和CD8+CCR7-CD27-T細(xì)胞INF-γ陽性細(xì)胞比例分別為11.042％(5.219％，14.750％)和44.409％(25.823％，47.427％)，高于慢性乙肝患者組和慢性HBV攜帶者組。 3.慢性乙型肝炎組、慢性HBV攜帶者組、非活動(dòng)性HBsAg攜帶者組以及HBV康復(fù)者組中HBcAg特異性CD8+T細(xì)胞對(duì)AA61-130肽

5、段池的INF-γ反應(yīng)強(qiáng)度分別為0.042％(0，0.076％)、0(0，0.032％)、0.068％(0.029％，0.151％)和0.005％(0，0.010％)；非活動(dòng)性HBsAg攜帶者組對(duì)于該肽段池的應(yīng)答強(qiáng)度顯著高于慢性HBV攜帶者組和HBV康復(fù)者組(P<0.009)，高于慢性乙肝患者組。對(duì)AAs 61-130肽段池的應(yīng)答中，非活動(dòng)性HBsAg攜帶者組CDS+CCR7-CD27+T細(xì)胞產(chǎn)生INF-γ的比例為0.103％(0.063

6、％，0.234％)，顯著高于慢性乙肝患者組、慢性HBV攜帶者組和HBV康復(fù)者組(P<0.009)。非活動(dòng)性HBsAg攜帶者組、慢性乙肝患者組CD8+CCR7-CD27-T細(xì)胞的INF-γ應(yīng)答強(qiáng)度分別為0.034％(0.008％，0.131％)和0.033％(0％，0.110％)，均顯著高于康復(fù)者組(P<0.009)。 [結(jié)論]： 1.慢性HBV感染者存在CD8+T細(xì)胞功能異常，非活動(dòng)性HBsAg攜帶者對(duì)非特異性刺激的細(xì)胞

7、免疫功能優(yōu)于慢性乙肝患者和慢性HBV攜帶者。 2.非活動(dòng)性HBsAg攜帶者體內(nèi)HBcAg特異性CTL應(yīng)答強(qiáng)于慢性乙肝患者、慢性HBV攜帶者和HBV康復(fù)者。HBcAg特異性CTL應(yīng)答反應(yīng)對(duì)機(jī)體清除病毒和抑制病毒復(fù)制有重要作用。 3.HBcAg中可以激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答清除病毒的抗原位點(diǎn)主要位于AAl-130覆蓋的區(qū)域內(nèi)。 4.CD8+CCR7-CD27+T淋巴細(xì)胞在慢性HBV感染的免疫發(fā)病機(jī)制中可能具有重要作用。