卵巢雌激素剝奪對(duì)成年大鼠傷害性反應(yīng)的影響及其機(jī)制探討.pdf

1、疼痛，是大多數(shù)疾病具有的共同癥狀，是人類共有而個(gè)體差異很大的一種不愉快的感覺。急性疼痛是一種癥狀，慢性疼痛則是一種疾病。與男性相比，女性通常經(jīng)歷著更多周期性的、劇烈并持久的疼痛。但是，絕經(jīng)婦女中下背痛的發(fā)生率隨著絕經(jīng)時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著增加。然而，目前大部分關(guān)于疼痛與鎮(zhèn)痛的研究主要是在雄性動(dòng)物上進(jìn)行，比較疼痛性別差異的研究也較少。這種以男性為中心的研究方法導(dǎo)致了女性繼續(xù)接受那些并非基于針對(duì)她們的研究所發(fā)展的治療手段，所以研究女性鎮(zhèn)痛尤為迫切

2、。
　　這種痛覺上性別差異的產(chǎn)生，很大程度是由于性激素作用的緣故。其中雌激素（主要是雌二醇）扮演著關(guān)鍵角色。雌激素參與痛覺調(diào)控的機(jī)制很復(fù)雜，但其究竟是起到了“致痛”還是“抑痛”的作用，尚存在較大分歧。
　　卵巢切除(ovariectomy, OVX)大鼠是用來(lái)研究雌激素替代治療對(duì)疼痛反應(yīng)的良好模型。目前，這個(gè)模型已被用于評(píng)估雌激素對(duì)疼痛及鎮(zhèn)痛的作用研究。OVX大鼠痛閾是否發(fā)生變化？會(huì)發(fā)生怎樣的變化？引起這些變化的機(jī)制如何？脊

3、髓是否參與其中？假如雌激素是通過(guò)其特異性受體發(fā)揮作用的，那么在這個(gè)模型中脊髓中雌激素受體是否發(fā)生了變化？本研究圍繞這一系列問(wèn)題，采用行為學(xué)、Western blot、免疫組織化學(xué)等實(shí)驗(yàn)方法，在OVX大鼠模型上首次系統(tǒng)地研究了OVX術(shù)后大鼠生理性痛、炎癥性疼痛及神經(jīng)病理性疼痛行為的變化，并對(duì)脊髓雌激素受體的作用及其可能機(jī)制進(jìn)行了探討。主要結(jié)果如下:
　　1.OVX大鼠對(duì)機(jī)械和熱刺激反應(yīng)的影響
　　機(jī)械反應(yīng)閾值:通過(guò)von-Fr

4、ey法進(jìn)行測(cè)試。結(jié)果發(fā)現(xiàn)OVX組術(shù)后4周大鼠雙側(cè)后爪對(duì)機(jī)械刺激的反應(yīng)閾值開始下降，至術(shù)后5周出現(xiàn)明顯的觸誘發(fā)痛，并至少持續(xù)到術(shù)后7周。與正常大鼠和假手術(shù)組比較具有顯著性差異，激素替代治療可翻轉(zhuǎn)OVX術(shù)后的觸誘發(fā)痛。
　　輻射熱縮腿潛伏期:用Hargreaves'法測(cè)定。OVX不影響大鼠輻射熱縮退反射，但給予雌激素替代后潛伏期有延長(zhǎng)的趨勢(shì)。
　　輻射熱甩尾潛伏期:用Tail flick test法測(cè)定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，OVX動(dòng)物術(shù)后

5、2周開始對(duì)輻射熱甩尾潛伏期明顯縮短，并至少持續(xù)到術(shù)后5-7周。說(shuō)明OVX易化大鼠輻射熱甩尾反射。雌激素替代處理后，這種熱痛敏現(xiàn)象被取消，甚至出現(xiàn)痛覺鈍化，即熱甩尾潛伏期明顯大于正常組和假手術(shù)對(duì)照組。
　　炎癥性疼痛:OVX術(shù)后5周，大鼠單側(cè)足底注射5％福爾馬林(50μl)后對(duì)自發(fā)痛進(jìn)行評(píng)分。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組比較，福爾馬林組注射側(cè)后爪自發(fā)痛評(píng)分顯著增高。給予雌激素處理1周，部分抑制了大鼠福爾馬林痛反應(yīng)。
　　神經(jīng)病理性疼痛:

6、行單側(cè)坐骨神經(jīng)慢性壓迫術(shù)(CCI)后3天，大鼠出現(xiàn)明顯的觸誘發(fā)痛，表明已成功建立(CCI)模型。有趣的是，對(duì)已經(jīng)出現(xiàn)觸誘發(fā)痛的OVX大鼠，CCI并不能引起大鼠損傷側(cè)后爪對(duì)機(jī)械性刺激反應(yīng)閾值的進(jìn)一步降低。
　　2.脊髓背角雌激素受體參與OVX后痛敏的形成
　　免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:大鼠腰段脊髓背角有雌激素受體α(ERα)和雌激素受體β(ERβ)的存在;ERα和ERβ主要分布于神經(jīng)元，不與膠質(zhì)細(xì)胞共存。Western blot顯

7、示，伴隨OVX引起的痛敏行為的同時(shí)，脊髓背角ERα表達(dá)上調(diào)，而ERβ的表達(dá)下調(diào)?？紤]到雌激素替代可翻轉(zhuǎn)痛敏行為和ERα表達(dá)水平，而對(duì)ERβ表達(dá)水平無(wú)明顯改善，我們推測(cè)，長(zhǎng)期OVX引起的痛敏可能主要通過(guò)脊髓ERα介導(dǎo)。
　　3.PI3K/Akt信號(hào)通路參與脊髓ERα上調(diào)對(duì)大鼠疼痛的調(diào)節(jié)作用
　　長(zhǎng)期雌激素低水平引起大鼠脊髓tAkt表達(dá)顯著增加，雌激素替代可使其下調(diào);pAkt變化趨勢(shì)與tAkt一致。鞘內(nèi)預(yù)先給予Akt上游PI3K