一株芽孢桿菌胞外多糖(EPS)對(duì)LPS誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的影響及機(jī)制的研究.pdf

1、多糖類化合物廣泛存在于動(dòng)物、植物和微生物中。隨著糖生物學(xué)的飛速發(fā)展，多糖的結(jié)構(gòu)與其自身理化性質(zhì)及生物學(xué)活性間的關(guān)系不斷被闡明，多糖在食品、醫(yī)藥、石油及化工等領(lǐng)域的應(yīng)用越來(lái)越被人們所關(guān)注。通常植物和藻類來(lái)源的多糖較為普遍。但近些年來(lái)，微生物來(lái)源的多糖越來(lái)越成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)，尤其是細(xì)菌的胞外多糖，由于它具有安全無(wú)毒、理化性質(zhì)獨(dú)特、用途廣泛、易與菌體分離及可通過(guò)深層發(fā)酵實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)良性質(zhì)而備受關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)所用的細(xì)菌胞外多糖(EPS)是

2、從新疆寡營(yíng)養(yǎng)環(huán)境一羅布泊沙漠中分離的一株寡營(yíng)養(yǎng)細(xì)菌(Bacillus sp.LBP32)中提取的。
　　本研究以小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞系為研究模型，研究EPS在LPS引起的炎癥反應(yīng)中的抑炎效果。LPS為革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的主要成分，是引發(fā)膿毒癥的主要因素。膿毒癥休克能引起嚴(yán)重的循環(huán)系統(tǒng)障礙，致死率高達(dá)30-90％且治療無(wú)效。促炎細(xì)胞主要是指活化的巨噬細(xì)胞，它們?cè)谘装Y過(guò)程中能夠產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子和促炎分子，包括TNF-α，

3、一氧化氮(NO)，白細(xì)胞介素1(IL-1)，IL-6，IL-8，血小板活化因子等。這些分子能夠在細(xì)胞和分子水平上引起膿毒癥的病理生理反應(yīng)。因而，調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞源性的NO和炎癥因子的生成成為治療各種炎癥相關(guān)疾病的一個(gè)重要的靶點(diǎn)。
　　本實(shí)驗(yàn)證明EPS可以明顯抑制促炎因子TNF-α，IL-6和NO的生成，而且能抑制LPS誘導(dǎo)的一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA和蛋白水平。此外，EPS可通過(guò)抑制IKKα/β的磷酸化進(jìn)一步減少NF-kB的核

4、轉(zhuǎn)移，從而下調(diào)NF-kB的活性。同時(shí)，本實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了EPS可抑制MAPKs信號(hào)通路，包括ASK1介導(dǎo)的p38和JNK信號(hào)通路。另外，LPS誘導(dǎo)的胞內(nèi)的ROS水平也受到EPS的調(diào)控。內(nèi)毒素休克小鼠模型證明EPS可顯著提高其存活率。這些結(jié)果表明在小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞中EPS能夠通過(guò)影響LPS刺激下ROS的釋放，從而抑制了MAPKs中的ASK1-MKK3/6/MKK4-p38/JNK通路及NF-κB的核轉(zhuǎn)移，減少促炎因子的生成，提