淀粉樣多肽聚集體調(diào)控及其與脂質(zhì)體的相互作用研究.pdf

1、多肽與細(xì)胞膜的相互作用是一個(gè)生物學(xué)的基本問題，與一系列的生物學(xué)活動(dòng)有關(guān)。比如淀粉樣多肽對(duì)細(xì)胞膜的破壞作用與淀粉樣多肽的致病機(jī)理有關(guān);抗菌多肽與細(xì)菌膜相互作用與其抗菌機(jī)理密切相關(guān);穿膜多肽與膜相互作用并不破壞膜結(jié)構(gòu)，可以完成藥物轉(zhuǎn)載進(jìn)入細(xì)胞的任務(wù)?；谏鲜錾铿F(xiàn)象啟示，本文主要通過研究淀粉樣多肽片段Aβ33-42與模擬細(xì)胞膜的脂質(zhì)體的相互作用機(jī)理，以及Aβ33-42的調(diào)控組裝體與脂質(zhì)體的相互作用來幫助理解多肽與細(xì)胞膜的相互作用機(jī)理。

2、>　　Aβ33-42是位于APP跨膜結(jié)構(gòu)域的關(guān)鍵片段，同時(shí)也是Aβ42全序列形成發(fā)卡結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵片段。本論文以淀粉樣多肽片段Aβ33-42為切入點(diǎn)，首先研究了Aβ33-42聚集體對(duì)脂質(zhì)體膜的破壞能力，其次通過氧化石墨烯對(duì)Aβ33-42自組裝結(jié)構(gòu)進(jìn)行了調(diào)控，最后使用氧化石墨烯與A33-42的混合物來測(cè)試其對(duì)脂質(zhì)體膜的破壞作用。全文主要內(nèi)容如下:
　　1)本文首先研究Aβ33-42片段的聚集體對(duì)脂質(zhì)體膜的破壞能力。通過不同的孵育時(shí)間得到

3、Aβ33-42中間體和成熟的纖維。使用原子力顯微鏡、圓二色譜和染料釋放效率等檢測(cè)手段揭示了A33-42中間體破壞脂質(zhì)體膜的機(jī)理:Aβ33-42中間體可以破壞脂質(zhì)體形成膠束，之后這些由Aβ33-42中間體和脂質(zhì)體組成的混合物膠束，通過長(zhǎng)時(shí)間孵育合并成大的聚集體。當(dāng)與脂質(zhì)體結(jié)合后，Aβ33-42的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，不再是原來純粹的beta折疊結(jié)構(gòu)。該部分工作研究表明，淀粉樣多肽在聚合的早期階段形成的納米結(jié)構(gòu)易于與脂質(zhì)體相互作用，推測(cè)其可能與

4、細(xì)胞膜也會(huì)有很好的相互作用。
　　2)通過氧化石墨烯對(duì)Aβ33-42片段的自組裝結(jié)構(gòu)進(jìn)行了調(diào)控。氧化石墨烯具有調(diào)控淀粉樣多肽自組裝納米結(jié)構(gòu)的能力。于此，使用原子力顯微鏡和圓二色譜來研究氧化石墨烯片層對(duì)Aβ33-42自組裝的調(diào)控效果。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，氧化石墨烯片層與Aβ33-42單體結(jié)合，可以改變Aβ33-42自組裝的路徑，這部分工作的研究結(jié)果提供了一種新的簡(jiǎn)便方式來調(diào)控淀粉樣多肽的組裝。
　　3)研究不同尺寸的氧化石墨烯對(duì)Aβ

5、33-42片段自組裝結(jié)構(gòu)的調(diào)控。首先通過超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)得到不同尺寸的氧化石墨烯。然后使用原子力顯微鏡、石英晶體微天平和圓二色譜來研究了不同尺寸的氧化石墨烯片層對(duì)Aβ33-42自組裝過程的調(diào)控。該部分研究發(fā)現(xiàn)氧化石墨烯的橫向尺寸越大，對(duì)Aβ33-42片段的調(diào)控作用越強(qiáng)。
　　4)在研究了氧化石墨烯對(duì)Aβ33-42自組裝結(jié)構(gòu)的調(diào)控后，接下來研究調(diào)控形成的復(fù)合結(jié)構(gòu)對(duì)脂質(zhì)體膜的破壞作用。使用原子力顯微鏡、圓二色譜來測(cè)定氧化石墨烯和Aβ3