無比山藥丸對去除卵巢所致骨質(zhì)疏松癥大鼠骨髓中骨橋蛋白和腎上腺素能受體β-2表達的影響.pdf

1、目的：
　　 以去卵巢所致骨質(zhì)疏松癥大鼠為模型，采用骨組織形態(tài)計量學方法，觀察無比山藥丸對其的作用，并從骨形成調(diào)控因子-骨橋蛋白和腎上腺素能受體β-2蛋白的角度，部分揭示其作用機理，為中醫(yī)藥防治骨質(zhì)疏松癥提供進一步的科學依據(jù)。
　　 方法:
　　 選用雌性SD大鼠77只，先按體重隨機分為3組:空白對照組12只，假手術組12只，造模組53只。造模組大鼠用戊巴比妥鈉麻醉后，摘除雙側(cè)卵巢，假手術組只摘取卵巢周圍少許脂肪

2、組織。術后15天，再按體重將造模大鼠隨機分為4組:模型組13只、雷洛昔芬組13只、無比山藥丸高劑量組14只、無比山藥丸低劑量組13只。然后開始灌胃給藥:雷洛昔芬組的給藥劑量為5mg/kg;無比山藥丸高、低劑量組的給藥劑量分別為20g生藥/kg、10g生藥/kg。以上給藥一天一次，連續(xù)6天，休息1天后，再連續(xù)給藥6天，如此給藥13周。空白對照組、假手術組、模型組按同法灌胃給予等體積的純凈水。
　　 分別在大鼠處死前15d和前3d腹

3、腔注射鹽酸四環(huán)素30mg/kg體重，以對骨進行熒光標記。給藥結(jié)束后，用45mg/kg體重劑量的戊巴比妥鈉給大鼠腹腔注射麻醉后，迅速將各組大鼠斷頭處死，取右側(cè)脛骨，用4％多聚甲醛溶液固定，制作不脫鈣骨切片，用于骨組織形態(tài)計量學檢測。取左側(cè)脛骨，制作冰凍切片，用于骨髓中骨橋蛋白和腎上腺素能受體β-2蛋白表達的檢測。
　　 統(tǒng)計學方法:所得實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差((x)±s)表示，采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD法。

4、　　 結(jié)果:
　　 1、無比山藥丸對去卵巢大鼠骨組織形態(tài)計量學指標的影響。
　　 1.1、無比山藥丸對去卵巢大鼠脛骨TBV％的影響。
　　 模型組及各給藥組大鼠脛骨TBV％較假手術組顯著降低。與模型組比較，無比山藥丸高、低劑量組TBV％顯著升高;無比山藥丸高、低劑量組之間比較無顯著性差異。陽性對照（雷洛昔芬）組的TBV％顯著高于模型組。
　　 1.2、無比山藥丸對去卵巢大鼠脛骨TRS％的影響。
　

5、　 模型組、無比山藥丸高、低劑量組和雷洛昔芬組與假手術組比較，表示骨吸收參數(shù)的TRS％顯著升高;而與模型組比較，無比山藥丸高、低劑量組和雷洛昔芬組的TRS％皆顯著降低。
　　 1.3、無比山藥丸對去卵巢大鼠脛骨TFS％的影響。
　　 與假手術組比較，模型組、無比山藥丸高、低劑量組和雷洛昔芬組大鼠脛骨TFS％明顯升高;而無比山藥丸高、低劑量組和雷洛昔芬組的TFS％均低于模型組。
　　 1.4、無比山藥丸對去卵巢大

6、鼠脛骨MAR的影響。
　　 模型組、無比山藥丸高、低劑量組和雷洛昔芬組大鼠脛骨MAR較假手術組明顯升高;而與模型組相比，無比山藥丸高、低劑量組和雷洛昔芬組的MAR均降低。
　　 1.5、無比山藥丸對去卵巢大鼠脛骨mAR的影響。
　　 與假手術組比較，模型組大鼠脛骨的mAR明顯增高。無比山藥丸高劑量組mAR與模型組相比明顯降低;無比山藥丸低劑量組mAR與模型組相比無顯著性差異。與模型組比較，雷洛昔芬組mAR顯著降低

7、;與假手術組相比，雷洛昔芬組mAR無顯著差異。
　　 1.6、無比山藥丸對去卵巢大鼠脛骨OSW的影響。
　　 模型組大鼠脛骨的OSW較假手術組明顯增高。無比山藥丸高、低劑量組OSW與模型組相比無顯著性差異。雷洛昔芬組的OSW與模型組比較顯著降低，與假手術組相比無顯著差異。
　　 2、無比山藥丸對去卵巢大鼠骨髓中OPN蛋白表達的影響
　　 模型組大鼠脛骨骨髓中OPN蛋白表達陽性面積顯著高于假手術組。與模型組

8、比較，無比山藥丸高、低劑量組以及雷洛昔芬組的OPN蛋白表達陽性面積明顯減少;而與假手術組比較，高、低劑量組明顯增加，雷洛昔芬組無顯著性差異。高劑量組的OPN蛋白表達陽性面積明顯低于低劑量組。
　　 3、無比山藥丸對去卵巢大鼠骨髓中ARβ2蛋白表達的影響。
　　 與假手術組比較，模型組大鼠脛骨骨髓中ARβ2蛋白表達陽性面積顯著上調(diào)。無比山藥丸高、低劑量組及雷洛昔芬組的ARβ2蛋白表達較模型組有明顯下調(diào);低劑量組的ARβ2蛋

9、白表達較假手術組有顯著上調(diào)，高劑量組與雷洛昔芬組與假手術組無顯著性差異。
　　 與空白對照組比較，假手術組的上述指標均無顯著性差異，從而排除了手術因素對實驗的影響。
　　 結(jié)論：
　　 1、摘除大鼠卵巢15周后，作為衡量骨量主要標志的大鼠脛骨TBV％顯著減少，而代表骨吸收參數(shù)的TRS％以及代表骨形成參數(shù)的TFS％、MAR、mAR和OSW均顯著增加，表明卵巢切除所造成的是一種骨吸收大于骨形成的高轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松癥。而

10、除無比山藥丸高、低劑量對OSW以及低劑量對mAR無明顯影響外，該藥的高、低劑量均能使上述指標在一定程度上發(fā)生逆轉(zhuǎn)。說明無比山藥丸能抑制骨的高轉(zhuǎn)換，對去卵巢所致的骨質(zhì)疏松癥具有一定的預防作用。
　　 2、摘除大鼠卵巢15周后，大鼠脛骨骨髓中OPN和ARβ2蛋白表達均顯著上調(diào)，表明OPN和ARβ2在骨質(zhì)疏松發(fā)生過程中起著重要的作用;而無比山藥丸能使它們的蛋白表達顯著下調(diào)。這一結(jié)果提示，能夠下調(diào)OPN和ARβ2的蛋白表達是無比山藥丸對