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1、目的:研究中藥對體外培養(yǎng)的角質(zhì)形成細(xì)胞增殖及其細(xì)胞周期的影響,探討中藥治療銀屑病的作用機(jī)制。 方法:體外培養(yǎng)永生化的人類皮膚良性角質(zhì)形成細(xì)胞株HaCaT細(xì)胞;通過倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化;采用4-甲基偶氮唑藍(lán)比色法(MTT法)測定中藥對角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的影響;采用流式細(xì)胞儀分析藥物在不同濃度及不同作用時間下細(xì)胞DNA含量及細(xì)胞周期的變化。 結(jié)果:1.地骨皮具有促進(jìn)HaCaT細(xì)胞增殖的作用,并且隨著藥物濃度的增加地骨皮對
2、細(xì)胞的增殖作用增強(qiáng);其它七組藥物均具有細(xì)胞抑制作用,并且隨著藥物濃度的增加,抑制作用增強(qiáng)。藥物不同濃度組間細(xì)胞增殖率有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)。 2.八組藥物之間細(xì)胞增殖率有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01);其中“七皮飲”對細(xì)胞的抑制作用最強(qiáng),其次是大腹皮和白蘚皮,再次是丹皮和陳皮,地骨皮對細(xì)胞具有促增殖作用。 3.“七皮飲”對細(xì)胞G0/G1期的作用,表現(xiàn)在不同濃度組間有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01),并且隨著藥物濃度的增加,G
3、0/G1期細(xì)胞比例明顯增加;不同作用時間組間,有統(tǒng)計學(xué)差異(p<0.01),并且隨著時間的延長,G0/G1期細(xì)胞比例明顯增加。G0/G1期細(xì)胞比例濃度和時間具有明顯的計量反應(yīng)關(guān)系。 4.“七皮飲”對細(xì)胞G2/M期的作用,表現(xiàn)在不同作用時間組間G2/M期細(xì)胞比例有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01),在24小時時G2/M期細(xì)胞比例最高,72小時次之,48小時最小。不同濃度組間G2/M期細(xì)胞兩兩比較顯示,濃度6.25mg/ml組與對照組間,1
4、2.5mg/ml組與對照組間無統(tǒng)計學(xué)差異,其它各濃度組間有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 5.“七皮飲”對細(xì)胞S期的作用,表現(xiàn)在不同作用時間組間S期細(xì)胞比例有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01),在48小時S期細(xì)胞比例最高,24小時次之,72小時最小。不同濃度組間S期細(xì)胞比例有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01),并且隨著藥物濃度的增加,S期細(xì)胞比例明顯降低。 結(jié)論:地骨皮對HaCaT細(xì)胞具有促進(jìn)增殖的作用,并且隨著藥物濃度的增加對細(xì)胞增殖的
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