腺病毒介導(dǎo)XAF1基因誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文腺病毒介導(dǎo)XAF1基因誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的研究姓名：朱黎明申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（消化系?。┲笇?dǎo)教師：涂水平20090501上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文中文摘要2跡法檢測XAF1基因表達(dá)。2.甲基噻唑基四唑（MTT）、AnnexinVFITCPI雙染和原位末端標(biāo)記（TUNEL）法檢測感染Ad5F35XAF1前后細(xì)胞增殖和凋亡變化；以蛋白質(zhì)印跡法檢測凋亡相關(guān)蛋白Caspase3、Caspase8、Caspa

2、se9、PARP和Cytochromec的表達(dá)。3.建立肝癌細(xì)胞的裸鼠移植瘤模型研究Ad5F35介導(dǎo)XAF1基因在體內(nèi)對肝癌生長的抑制作用及評價其治療的安全性。結(jié)果結(jié)果1.成功構(gòu)建重組腺病毒Ad5F35XAF1、Ad5F35Null和Ad5F35EGFP。Ad5F35EGFP感染48h，MOI為2.0時，92%以上的肝癌細(xì)胞表達(dá)綠色熒光蛋白，提示Ad5F35病毒載體有較強(qiáng)的感染效率；XAF1基因的mRNA和蛋白的表達(dá)水平在三株肝癌細(xì)胞株

3、均較低甚至不表達(dá)感染Ad5F35XAF1后，該基因的表達(dá)水平均明顯升高；Ad5F35XAF1按不同MOI和不同時間感染SMMC7721細(xì)胞后，XAF1mRNA和蛋白表達(dá)均明顯增高而感染對照病毒Ad5F35Null的細(xì)胞其XAF1mRNA和蛋白表達(dá)水平無明顯變化。2.腺病毒載體介導(dǎo)的XAF1基因呈劑量和時間依賴性地抑制肝癌細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡，并伴隨Caspase3、Caspase8、Caspase9、PARP等凋亡相關(guān)蛋白的裂解和