葛根提取物的純化和功能研究.pdf

1、葛根是一種重要的藥用植物。其中的水溶性及其主要成份葛根多糖具有抗腫瘤及免疫活性。本論文以葛根為原料，采用水提法提取葛根多糖和小分子醇沉物質(zhì)，利用響應(yīng)曲面法優(yōu)化了葛根多糖的提取參數(shù)。通過DEAESepharoseFastFlow離子交換層析和SepharoseCL-6B凝膠過濾層析得到葛根蛋白結(jié)合多糖PP1b。通過DEAESpharoseFastFlow離子交換層析和SephacrylS-100HR凝膠過濾層析得到小分子醇沉物質(zhì)PPM2b

2、。通過高效液相色譜測定了PP1b和PPM2b的分子量，PPM2b經(jīng)肽質(zhì)量指紋圖譜分析推斷為一未知蛋白。對葛根多糖、葛根小分子醇沉物質(zhì)以及PPM2b、PPM1和PPM3進(jìn)行了小鼠T、B淋巴細(xì)胞增殖的影響實(shí)驗(yàn)。主要研究結(jié)果如下： 1.葛根粗多糖最佳提取工藝參數(shù)的確定。影響葛根粗多糖提取率的各因素主次順序是提取時(shí)間，隨后是提取時(shí)間的平方和液料比，葛根粗多糖的最佳提取參數(shù)為：液料比10.1:1、時(shí)間為6.2h。 2.葛根多糖的分

3、離純化。葛根粗多糖先經(jīng)DEAESepharoseFastFlow離子交換層析，洗脫峰PP1再經(jīng)SepharoseCL-6B凝膠過濾層析，得到主要單一組分PP1b。 3.葛根小分子醇沉物質(zhì)的分離純化。葛根小分子醇沉物質(zhì)先經(jīng)DEAESepharoseFastFlow離子交換層析，得到的四個(gè)主要組分中PPM1、PPM2、PPM4經(jīng)過SephacrylS-100HR，PPM3經(jīng)過SephadexG-25進(jìn)行進(jìn)一步的凝膠過濾層析，得到PP