獨一味凍干粉針的研制.pdf

1、目的：獨一味Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo(以下簡稱LRK)為藏族習用藥材，具有活血止血，祛風止痛，干黃水等功效。近年來，藏藥備受人們關注，藏藥獨一味由于其療效好，迄今未發(fā)現(xiàn)毒副作用而廣泛應用。獨一味總黃酮是獨一味鎮(zhèn)痛的有效部位，臨床可用于治療骨科骨折引起的疼痛，風濕痛等，有報道研究表明藏藥獨一味可作為癌痛第一階梯的止痛藥，可避免吲哚美辛產生的副作用。 目前，獨一味上市的制劑只有口服途徑給藥的劑

2、型，本文旨在研究獨一味凍干粉針，通過靜脈注射給藥，更大程度的開發(fā)獨一味，使其臨床應用更加廣泛，方便不能口服的患者。 本文篩選出了獨一味總黃酮的最佳提取工藝，對其進行了富集，得到獨一味中間體；篩選出獨一味凍干粉針的最佳處方并確定制備工藝，對其質量進行全面考察，初步建立了獨一味凍干粉針的質量標準；考察了獨一味凍干粉針作為注射劑的特殊安全性試驗，包括過敏性、溶血性及血管刺激性試驗；對獨一味原藥材、獨一味中間體及獨一味凍干粉針的指紋圖譜

3、作了初步研究，為其質量可控性提供了依據(jù)。 方法：采用正交試驗篩選出獨一味總黃酮的最佳提取工藝；采用AB-8大孔吸附樹脂分離純化獨一味總黃酮；提取液采用改良明膠法除去鞣質，蒸去乙醇后通過AB-8大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，以后分別用10％乙醇、20％乙醇、30％乙醇及50％乙醇洗脫；以甘露醇、葡萄糖、乳糖等為凍干支撐劑，制備獨一味凍干粉針；用RP-HPLC法(檢測波長347nm，DiamonsiL<'TM> ODS C<,18>(

4、鉆石)250×4.6mm，5μm色譜柱，甲醇：0.4％磷酸(50:50)為流動相，進樣量20μl，室溫，流速1ml/min)測定凍干粉針中木犀草苷的含量；按實驗篩選出的最佳處方在符合GMP要求的凍干粉針實驗室制備三批獨一味凍干粉針，繪制凍干曲線，并對其性狀、含量進行了考察；過敏性考察以豚鼠為實驗動物，以1％卵清蛋白為陽性對照組，進行致敏后攻擊，觀察過敏反應級數(shù)；以獨一味凍干粉針對2％紅細胞混懸液的影響進行溶血性考察；以家兔耳緣靜脈法進行

5、血管刺激性考察，肉眼觀察并作病理檢查；指紋圖譜研究采用RP-HPLC法，采用中藥指紋圖譜相關軟件對其進行分析。 結果：最佳提取工藝為：8倍量于原藥材的20％的乙醇溶液，1h/次，加熱回流三次；30％及50％乙醇合并洗脫液蒸干得到的固體為中間體；最佳處方工藝：中間體60mg，甘露醇240mg，注射用水6ml；獨一味凍干粉針的過敏性試驗為陰性，對紅細胞未見明顯的溶血和凝聚作用，對靜脈血管無刺激性；指紋圖譜共確定了獨一味凍干粉針的24