姜黃素衍生物的抗腫瘤活性篩選及對U87細胞的作用.pdf

1、姜黃素(Curcumin，Cur)是從姜科姜黃屬植物姜黃(CurcumalongaL.)根莖中提取的酚類天然產物。其藥理活性包括抗氧化、抗腫瘤、抗炎、抗動脈粥樣硬化、抗HIV病毒等。姜黃素雖然在藥理活性方面顯示出諸多優(yōu)點，尤其抗腫瘤作用具有潛在的臨床應用價值，但其依然存在穩(wěn)定性低、水溶性差、生物利用度低、體內代謝迅速等缺陷。 本文采用MTT法考察29個姜黃素衍生物對腫瘤細胞及人正常細胞的體外抗增殖作用。采用AO/EB、Hoech

2、st33258染色考察細胞的形態(tài)學變化；采用流式細胞術結合PI單染考察姜黃素衍生物Ⅵh誘導U87腦膠質瘤細胞凋亡及周期阻滯作用；采用RT-PCR技術對細胞周期素cyclinD1、細胞周期激酶抑制因子p21、p27及PCNA的mRNA水平進行了檢測；采用流式細胞術考察細胞的自噬。 在考察29個姜黃素衍生物對腫瘤細胞的存活率的影響實驗中發(fā)現：(1)大部分衍生物抑制HL-60細胞增殖的活性顯著高于四氫姜黃素(Ⅰ)，說明在酚羥基的鄰位氨

3、甲基化后，提高了母體化合物的抗癌活性。兩個酚羥基的鄰位都進行氨甲基化比僅在一個酚羥基的鄰位氨甲基化時獲得的姜黃素衍生物對HL-60細胞具有更強的抑制作用，且哌啶類衍生物活性高于哌嗪類，除芐基哌嗪的衍生物；(2)在Du145、C6、HepG2、HGC27中，兩個酚羥基的鄰位都進行氨甲基化的衍生物的抑制作用不如僅在一個酚羥基的鄰位氨甲基化時獲得的姜黃素衍生物強；(3)Ⅵh、Ⅶh在Du145、U87和HGC27細胞中的抗增殖活性強于姜黃素。

4、 考察兩種姜黃素衍生物Ⅵh、Ⅶh對人正常細胞(人外周血淋巴細胞和人乳腺上皮細胞)的存活率的影響，結果發(fā)現，衍生物Ⅵh僅在高濃度對人正常細胞存活率有影響，而姜黃素及衍生物Ⅶh在較低濃度即對正常人細胞存活率有影響。 在考察姜黃素衍生物Ⅵh對膠質瘤U87抗增殖作用的機制研究中發(fā)現：(1)Ⅵh對U87膠質瘤細胞增殖具有明顯的抑制作用，隨濃度的增加和時間的延長而增強；(2)Ⅵh可誘導U87的凋亡，但不影響線粒體膜電位(MMP)；(3

5、)Ⅵh通過抑制cyclinD1、PCNA的mRNA表達，增加p21、p27的mRNA表達，使U87膠質瘤細胞阻滯在G0/G1期；(4)Ⅵh不引起U87細胞的自噬。 本文通過考察姜黃素及其衍生物的體外抗腫瘤活性，得到一定的構效關系，為進一步合成具有更好腫瘤治療作用的新化合物提供信息。此外，對姜黃素衍生物Ⅵh抑制U87腦膠質瘤細胞增殖作用機理進行了研究，發(fā)現與其改變腫瘤細胞周期的分布，使細胞停滯于G1期，并進一步誘導細胞凋亡相關，提