新型單羰基姜黃素衍生物抗腫瘤作用及其機制研究.pdf

1、姜黃素是一種具有良好抗腫瘤活性的中藥提取單體活性成分，其抗腫瘤機制在不同的癌癥和腫瘤細胞上不同，機制的不同又導致對各腫瘤細胞敏感性不一。姜黃素盡管安全有效，但是其在體外不穩(wěn)定，在體內(nèi)的代謝速度極快、吸收少、生物利用度低等限制了其臨床應用。為改善姜黃素藥代動力學特征，我們設計了一類去除掉不穩(wěn)定β-二酮基團的單羰基姜黃素衍生物，初步結果發(fā)現(xiàn)多個新型單羰基姜黃素衍生物具有較好穩(wěn)定性和體內(nèi)藥代學特征。在以前的工作基礎上，本文重點探討了新型具有自

2、主知識產(chǎn)權的單羰基姜黃素衍生物B06和B63與姜黃素比較不同的抗腫瘤活性及其機制，并進行了體內(nèi)安全性和藥代動力學實驗以驗證B06和B63的這些特征，為將來新藥開發(fā)奠定一定的理論基礎。
　　 本文首先對新合成的化合物展開了抗腫瘤活性篩選，根據(jù)篩選結果，選擇結構類似的單羰基姜黃素衍生物B06和B63分別探討抗腫瘤機制。我們發(fā)現(xiàn)對于非小細胞肺癌細胞系H460細胞，在相同濃度下僅B63能通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激途徑(ERS)誘導細胞凋亡，而B06

3、和姜黃素都沒有此功能。結果顯示B63劑量依賴性抑制H460和H358細胞增殖，B63在較低濃度下誘導H460細胞凋亡，而姜黃素沒有此作用。B63可破壞細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣穩(wěn)態(tài)，誘導H460細胞產(chǎn)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激。Western Bolt和RT-PCR也顯示B63可以顯著增加ERS信號通路轉導蛋白ATF-4、XBP-1、CHOP、GRP78表達，并最終通過激活caspase-3直接誘導細胞凋亡。CHOP-SiRNA實驗表明CHOP蛋白是影響B(tài)63抑制

4、H460細胞的關鍵蛋白，而姜黃素不能通過ERS信號途徑誘導細胞凋亡。實驗結果還顯示B63對正常的小鼠肝細胞CHOP表達的影響不大，表明B63可較特異性的通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激信號轉導通路誘導腫瘤細胞凋亡。
　　 本文繼續(xù)探討了B06抗非小細胞肺癌機制。單羰基姜黃素衍生物B06較姜黃素在H460細胞上具有更好的抑制COX-2活性，能在蛋白水平和mRNA水平抑制PMA誘導的COX-2表達，抑制作用顯著強于姜黃素；B06可通過影響細胞內(nèi)HuR

5、的核-漿轉移，促進COX-23'UTR區(qū)域與HuR結合減少，COX-2 mRNA不穩(wěn)定并降解增加，COX-2蛋白表達減少。B06可能通過抑制COX-2而抑制非小細胞肺癌的轉移和侵襲，表現(xiàn)出不同于B63抗非小細胞肺癌的機制。
　　 此外，我們同時比較B06、B63和姜黃素對于輻射抗拒鼻咽癌細胞的作用及其機制。結果顯示單羰基姜黃素衍生物與姜黃素抑制鼻咽癌細胞的作用機制可能不同，單羰基姜黃素衍生物B63和B06可激活ERS信號通路，誘