全反式維甲酸體外對(duì)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討全反式維甲酸(all-trans-retinoic-acid；ATRA)體外對(duì)人肝癌細(xì)胞系SMMC-7721細(xì)胞體外生長(zhǎng)增殖的抑制作用，以及在此過(guò)程中Survivin基因表達(dá)的變化。 方法：以不同濃度的ATRA處理SMMC-7721細(xì)胞，用甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)研究細(xì)胞增殖抑制情況；倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化；流式細(xì)胞儀（FCM)Annexin V/PI雙染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率的變化；FCM單染色法檢測(cè)細(xì)胞周

2、期的變化；免疫細(xì)胞化學(xué)法及RT-PCR琺檢測(cè)Survivin蛋白和基因表達(dá)水平的變化。 結(jié)果=①全反式維甲酸(ATRA)對(duì)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖有抑制作用，這種抑制作用呈時(shí)間和劑量依賴性，隨著藥物濃度的逐漸增加和作用時(shí)間的逐漸延長(zhǎng)，抑制作用呈遞增趨勢(shì)；②ATRA能夠誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的凋亡，隨藥物作用時(shí)間的延長(zhǎng)、藥物濃度的增高，細(xì)胞凋亡率逐漸增高；⑧細(xì)胞周期發(fā)生明顯變化，G1/GO期細(xì)胞比例逐漸增多，S期

3、逐漸減少，細(xì)胞被阻滯在G1/GO期，但對(duì)G2/M期細(xì)胞的影響則較小。ATRA能夠阻止細(xì)胞由G1/GO期向S期轉(zhuǎn)化，分裂活躍的S期減少，相對(duì)靜止的G1/GO期細(xì)胞增多，細(xì)胞分裂的周期延長(zhǎng)，細(xì)胞分裂減少，細(xì)胞增殖受到抑制；④在細(xì)胞凋亡增加和逐漸被分化的同時(shí)，Survivin表達(dá)逐漸下調(diào)。 結(jié)論：①全反式維甲酸對(duì)人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721具有明顯的增殖抑制作用，并呈現(xiàn)一定的時(shí)間、劑量依賴性；②全反式維甲酸可以誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞株SMM