外源DNA導入玉米自交系獲得變異新品系的研究.pdf

1、本試驗利用浸種法與花粉管通道法將外源DNA導入玉米自交系，其后代產生了多種變異類型，變異性狀十分豐富，主要包括：農 藝性狀的變異(如株高、穗位高、葉片數(shù)、葉片形狀與顏色、葉 片的長度與寬度、光合葉面積、百粒重和生育期等)。這些變異性 狀產生了新的性狀，并且在D<,3>代趨向穩(wěn)定。并進行了過氧化物酶 同工酶酶譜，葉綠素含量，營養(yǎng)指標等分析。通過三年種植，綜 合各項測定指標及農藝性狀觀察，從中選出了一些遺傳穩(wěn)定的優(yōu) 良變異材料，

2、具體結果如下： 1．浸種法 提取供體大豆DNA，以300ug/mI濃度，導入受體糯12-9-10玉米自交系，在D<,0>代獲得了7.74％的變異率。分析過氧化物酶同工酶酶譜，結果表明：變異植株的過氧化物酶同工酶在RF-12，RF=13處比受體少兩條酶帶，其余的酶帶與受體相同。從D<,0>到D<,3>代連續(xù)4代田間性狀觀察統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，變異植株的株高、穗位高、光合葉面積等均有變化。D<,3>一1 0②株高比對照(117cm)

3、矮3．67cm；D<,3>-10①葉面積比對照(203.99 cm<'2>)大229.04cm<'2>。但由于雄性不育，在D<,2>代和D<,3>代的幾個株系未收獲到種子。 2．花粉管通道法提取供體甘蔗DNA，以3001μg/ml、5001μg/ml濃度，在受體(普通玉米自交系7313)自交授粉后18h、20h、22h、24h導入。對不同導入時間和導入濃度的變異株的農藝性狀觀察、統(tǒng)計與分析，結果表明這些變異表現(xiàn)為：株高變矮、生育

4、期縮短、百粒重增重、葉面積增加等，并且多數(shù)性狀在D<,3>代就趨于穩(wěn)定，中只有個別性狀分離。從中選出2個早熟、矮桿的變異株系20-500①和20-500②：生育期提前3天；株高分別為144.16cm和148.32 cm，比對照(169.2 cm)減少了25.04 cm和20.88cm。同時對20-500處理獲得的變異株進行過氧化物酶同工酶酶譜分析，結果表明變異后代與受體間有明顯的差異(如變異株在遷移率為Rf<,11>1＝0.51出現(xiàn)供體

5、甘蔗酶帶，且顏色一樣即酶活性不變；在Rf<,14>＝0.62也出現(xiàn)，但顏色變淺，酶活性減弱，而在受體對照(普7313)沒有這兩條酶帶)。對D<,3>代穩(wěn)定株系籽粒的糖分、蛋白質、淀粉含量進行測定分析，發(fā)現(xiàn)這些株系既能保持原有的性狀，又增加了新的優(yōu)良性狀：(蛋白質、淀粉和糖分含量增加)如20-500①和20-500②，可溶性糖含量在25天和30天分別為4.41％和1.63％，比受體對照(1.58％和1.28％)提高2.83％和0.35％；