廣西部分地區(qū)商業(yè)肉鴨群鴨疫里默氏桿菌病的研究.pdf

1、鴨疫里默氏桿菌(Riemerella anatipestifer，RA)病是目前危害養(yǎng)鴨業(yè)最為嚴(yán)重的疾病之一，主要侵害1～7周齡雛鴨，呈急性或慢性敗血癥，其主要病理特征是纖維素性心包炎、肝周炎、氣囊炎。該病由于高死亡率、增重緩慢給養(yǎng)鴨業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，在廣西對(duì)該病進(jìn)行全面的研究，對(duì)于該病的有效防制是十分必要的。 課題對(duì)廣西的南寧、容縣、欽州三個(gè)地區(qū)不同日齡的29個(gè)商業(yè)肉鴨群共184羽有漿膜炎病變的?。励嗊M(jìn)行RA的分

2、離與鑒定。分離株在燭缸培育的巧克力培養(yǎng)基上長(zhǎng)成圓形、稍突起、表面光滑、透明，直徑0.5～2mm的菌落，而在麥康凱平板上不生長(zhǎng)；革蘭氏染色后鏡檢可見(jiàn)呈革蘭氏陰性的短小桿菌，單個(gè)、成雙或呈鏈狀，瑞氏染色顯示兩極濃染；經(jīng)生化反應(yīng)的鑒定，結(jié)果有82個(gè)分離菌株的生化鑒定結(jié)果與RA參考菌株NN050021①的基本一致；分別應(yīng)用血清2型和血清6型的RA參考菌株制備的陽(yáng)性血清對(duì)分離菌株進(jìn)行玻片凝集試驗(yàn)，結(jié)果82個(gè)分離菌株均與RA血清2型的陽(yáng)性血清呈陽(yáng)性

3、反應(yīng)；應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction，PCR)對(duì)分離株的42kD外膜蛋白基因進(jìn)行擴(kuò)增，結(jié)果所有分離菌株均能擴(kuò)增到與RA參考株一樣的一條809bp大小的特異片段，而鴨源的大腸桿菌和鴨源的多殺性巴氏桿菌均未能擴(kuò)增到相應(yīng)片段；隨機(jī)選取24個(gè)RA分離株進(jìn)行12種常用藥物的敏感性試驗(yàn)，結(jié)果表明大多數(shù)分離株對(duì)頭孢唑啉、頭孢啦啶、頭孢哌酮表現(xiàn)高度敏感，而對(duì)恩諾沙星、洛美沙星、環(huán)丙沙星、強(qiáng)力霉素、卡那霉素表現(xiàn)有抗

4、藥性；同時(shí)對(duì)RA陽(yáng)性病料進(jìn)行大腸桿菌(E.coli)的分離。 通過(guò)12日齡鴨胚尿囊腔和10日齡雞胚尿囊腔的途徑按4:1、l:1菌量同時(shí)接種RA和E．coli分離株的種子液，分別收集接種后48h內(nèi)死亡的鴨胚和雞胚的尿囊液、尿囊膜和胚體并制成勻漿混合液，經(jīng)福爾馬林滅活后按常規(guī)方法與礦物油分別制備成了油包水的二聯(lián)油乳劑滅活疫苗Ⅰ和Ⅱ，并進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室免疫保護(hù)試驗(yàn)、田間免疫攻毒試驗(yàn)和田間小規(guī)模免疫應(yīng)用效果的觀察。5組每組各12羽的

5、櫻桃谷肉鴨，5日齡時(shí)1、2、3、4組頸部皮下接種疫苗Ⅰ (1羽份)，5組則接種生理鹽水。20天后取1、2、3和5組分別用同源的RA(5×10<'8>個(gè)CFU)、E.coli(5×10<'7>個(gè)CFU和相同菌量的RA和E.coli混合菌液進(jìn)行腹腔內(nèi)接種攻毒，結(jié)果各組的保護(hù)率分別為83.3[％]、83.3[％]、75[％]和O[％]；4組12日齡時(shí)再用該二聯(lián)苗1羽份進(jìn)行二免，免疫后(post-immunization，PI)20天以相同菌量

6、的RA和E.coli混合菌液進(jìn)行腹腔內(nèi)接種攻毒，保護(hù)率為100[％]；田間2群4 000羽櫻桃谷肉鴨5日齡頸部皮下接種疫苗I(1羽份)，至25日齡、42日齡為止，經(jīng)觀察統(tǒng)計(jì)，對(duì)RA和E.coli自然感染的保護(hù)率分別為98.4[％]、100[％]和100[％]、98[％]；田間5 800羽櫻桃谷肉鴨8曰齡時(shí)頸部皮下接種疫苗Ⅱ(1羽份)，分別在PI 10天、20天、30天、40天共4次隨機(jī)各抽取15羽免疫鴨，每次分成A、B、C三組，每組5羽

7、，分別用同源的RA(5×10<,8>個(gè)CFU)、E.coli(5×10<'7>個(gè)CFU)和相同菌量的RA和E.coli混合菌液進(jìn)行腹腔內(nèi)接種攻毒，結(jié)果各次的保護(hù)率分別為O[％]、60[％]、20[％]，60[％]、100[％]、40[％]，80[％]、100[％]、80[％]，80[％]、100[％]、80[％]。 研究結(jié)果證明，在廣西部分地區(qū)的商業(yè)肉鴨群中血清2型RA的感染較為普遍，而且常常與E.coli混合感染；以鴨胚來(lái)作