銀杏葉提取物和羅格列酮對(duì)高脂喂養(yǎng)大鼠胰腺NF-κB表達(dá)和β細(xì)胞凋亡影響的研究.pdf

1、目的：通過(guò)高脂喂養(yǎng)誘導(dǎo)大鼠胰島素抵抗（insulin resisitance，IR）模型，測(cè)定胰腺組織核因子-κB（Nuclear factor-κB NF-κB）表達(dá)、胰島β細(xì)胞凋亡情況及血液中炎癥因子白介素1-β（interleukin1-β，IL-1β）水平，并給予銀杏葉提取物和羅格列酮治療，研究其在改善IR及保護(hù)胰島β細(xì)胞功能中的作用。
　　 方法：①64只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（NC組，n=16）和高脂

2、喂養(yǎng)組（HF組，n=48），NC組給予基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，HF組給予高脂飼料喂養(yǎng)4周。兩組各取8只大鼠行高胰島素正葡萄糖鉗夾試驗(yàn)。其余高脂喂養(yǎng)大鼠隨機(jī)分為高脂對(duì)照組（HF組）繼續(xù)給予高脂飼料喂養(yǎng)4周；羅格列酮（RSG）組，銀杏葉提取物4mg-1kg-1d（EGB1）組，銀杏葉提取物8mg-1kg-1d（EGB2）組，銀杏葉提取物12mg-1kg-1d（EGB3）組，每組n=8。在高脂喂養(yǎng)同時(shí)分別給予相應(yīng)藥物干預(yù)。②于實(shí)驗(yàn)第8周末各組大鼠行口服

3、葡萄糖耐量試驗(yàn)和高胰島素正葡萄糖鉗夾試驗(yàn)。③鉗夾后處死大鼠留取血標(biāo)本和胰腺組織標(biāo)本。用生化分析儀測(cè)定血脂，銅顯色法測(cè)定游離脂肪酸，Western blot檢測(cè)胰腺組織NF-κ B蛋白表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）測(cè)定IL-1β水平；末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP原位缺口標(biāo)記技術(shù)（terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP

4、 nickend labeling，TUNEL）檢測(cè)胰島β細(xì)胞凋亡。
　　 結(jié)果：1.實(shí)驗(yàn)第4周末，與NC組相比，HF組大鼠體重（body weight，BW）有所增加，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；游離脂肪酸（free fatty aicd，F(xiàn)FA）、空腹血糖（fasting plasma glucose， FPG）、空腹胰島素（fasting plasma insulin，F(xiàn)IN）升高，葡萄糖輸注率（glucose infusion

5、rate，GIR）下降。試驗(yàn)第8周末，與NC組相比，HF組大鼠體重有所增加，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；FFA、FPG、FIN、甘油三酯（triglyceride TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）升高，GIR繼續(xù)下降。2.試驗(yàn)第8周末，與NC組相比，各藥物干預(yù)組大鼠體重、FFA、FPG、FIN、TG、 TC、GIR均無(wú)明顯差異。與HF組相比，RSG組TC、TG、FPG、FIN、FFA下降，GIR升高；銀杏葉各組上述指

6、標(biāo)改善程度不同：EGB1組TC、TG、FFA下降；FPG、FIN、GIR變化不明顯。EGB2、EGB3組TC、TG、FFA、FPG、FIN均下降，GIR升高。與EGB1組比較，EGB2、EGB3組TG、FIN降低，EGB3組FFA降低，GIR升高。RSG組與EGB2、3組之間各項(xiàng)指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.試驗(yàn)第4周末，與NC組比較，HF組血糖在0min、60min、120min升高，曲線下面積AUC升高。試驗(yàn)第8周末，與NC組比較，H

7、F組大鼠0min及糖負(fù)荷后60min、120min血糖及曲線下面積AUC均升高。與HF組比較，EGB1組0min、120min血糖降低；EGB2、3組和RSG組0min、120min血糖和AUC下降。EGB2組60min血糖較RSG組及EGB1組下降，EGB3組120min血糖低于EGB1組和EGB2組。4.試驗(yàn)第8周末，與NC組相比，HF組IL-1β濃度升高，與HF組比較，各藥物干預(yù)組IL-1β濃度降低，各藥物干預(yù)組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意

8、義。5.Western blot：與NC組比較，HF組胰腺組織NF-κB表達(dá)升高，與HF組比較，EGB2組及RSG組胰腺組織NF-κB表達(dá)降低，EGB2和RSG組之間無(wú)明顯差異。6。TUNEL：與NC組相比，HF組大鼠胰島β細(xì)胞凋亡率升高；EGB1、2、3組及RSG組大鼠胰島β細(xì)胞凋亡率無(wú)變化。與HF組相比，RGS、EGB1、EGB2、EGB3組大鼠胰島β細(xì)胞凋亡率降低，RGS與EGB1、EGB2、EGB3之間無(wú)明顯差異。
　　

9、 結(jié)論：1.高脂喂養(yǎng)大鼠血清總膽固醇、甘油三酯、游離脂肪酸、空腹血糖、空腹血清胰島素不同程度升高，血清炎癥因子IL-1β濃度升高，胰腺組織細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB蛋白水平升高，葡萄糖輸注率降低，胰島β細(xì)胞凋亡率升高，口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)證實(shí)高脂喂養(yǎng)大鼠對(duì)糖負(fù)荷的處理能力下降。2.銀杏葉提取物及羅格列酮可以降低高脂飲食大鼠血清膽固醇、甘油三酯、游離脂肪酸，增加葡萄糖輸注率，調(diào)節(jié)糖耐量，改善高脂飲食大鼠的胰島素敏感性。并呈現(xiàn)出一定的劑量相關(guān)