兩種槲寄生屬植物指紋圖譜研究.pdf

1、目的：
　　 研究兩種槲寄生屬植物的生藥學(xué)特征及指紋圖譜，并且對其粗提物抗腫瘤藥效學(xué)進(jìn)行初步研究。
　　 方法：
　　 實(shí)驗(yàn)一：按常規(guī)方法制取藥材組織橫切片及粉末片，進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察。
　　 實(shí)驗(yàn)二：采用薄層色譜(TLC)、高效液相色譜(HPLC)、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)三種方法建立兩種藥材的指紋圖譜。
　　 實(shí)驗(yàn)三：以人卵巢癌細(xì)胞系HO-8910、人胃癌細(xì)胞系SGC-7901及斑馬魚胚胎

2、為實(shí)驗(yàn)對象，進(jìn)行MTT及抑制腫瘤新生血管生成實(shí)驗(yàn)，初步研究兩種藥材50％甲醇粗提物抗腫瘤藥效學(xué)。
　　 結(jié)果：
　　 實(shí)驗(yàn)一：通過組織橫切片及粉末片可以區(qū)分開槲寄生的兩個(gè)種：扁枝槲寄生和槲寄生。
　　 實(shí)驗(yàn)二：TLC指紋圖譜表明，各樣品均含有古柯二醇、β-香樹脂醇和羽扇豆醇的混合物及齊墩果酸等斑點(diǎn)，展開劑甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(8∶2∶0.1)為最好；HPLC指紋圖譜表明，梯度洗脫獲得的兩種槲寄生指紋圖譜相似度均

3、較高，分別大于0.7；RAPD指紋圖譜表明，采用高鹽-低pH法提取的組織DNA符合PCR的要求，擴(kuò)增后跑膠，25個(gè)引物(S1-S25)中篩選出7個(gè)引物擴(kuò)增出多態(tài)性條帶。其中，引物S16對兩種槲寄生均有較好的擴(kuò)增效果。
　　 實(shí)驗(yàn)三：MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，槲寄生藥材對HO-8910及SGC-7901的IC50較大，分別為1.85-8.85 mg/mL、1.91-7.00 mg/mL，而扁枝槲寄生藥材對兩種細(xì)胞的IC50較小，分別為0

4、.64-1.97mg/mL、0.38-1.25mg/mL；斑馬魚實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，不同產(chǎn)地的槲寄生藥材在100μg/mL和10μg/mL下均無抑瘤活性，而扁枝槲寄生藥材在100μg/mL和10μg/mL濃度下抑制率分別為41.9-100％、28.5-35.87％，抑制作用較大。
　　 結(jié)論：
　　 實(shí)驗(yàn)對兩種槲寄生屬藥材進(jìn)行了生藥學(xué)研究，并建立了TLC、HPLC、RAPD指紋圖譜，為槲寄生藥材規(guī)范化研究和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供了參