基于相對(duì)校正因子同時(shí)測(cè)定爵床中木脂素類(lèi)成分的研究.pdf

1、目的：采用一測(cè)多評(píng)方法，在爵床多個(gè)有效成分中，選定一個(gè)性質(zhì)穩(wěn)定且對(duì)照品較容易獲得的成分作為內(nèi)參物，取各個(gè)指標(biāo)成分的對(duì)照品與內(nèi)參物的對(duì)照品，建立各成分相對(duì)于內(nèi)參物的相對(duì)校正因子，建立僅用一個(gè)對(duì)照品對(duì)多個(gè)成分進(jìn)行同時(shí)含量測(cè)定的方法。在此基礎(chǔ)上，以多個(gè)成分為指標(biāo)，對(duì)爵床藥材在儲(chǔ)藏過(guò)程中有效成分含量的變化進(jìn)行研究；并對(duì)爵床中木脂素的提取純化工藝進(jìn)行系統(tǒng)研究，為下一步的新藥研發(fā)提供技術(shù)支持。
　?。?）方法：（1）采用HPLC- DAD，求

2、得各被測(cè)成分相對(duì)于內(nèi)參物金不換萘酚甲醚的計(jì)算因子，從而實(shí)現(xiàn)以金不換萘酚甲醚為對(duì)照，同時(shí)測(cè)定樣品中6'-羥基爵床脂素A、6'-羥基爵床脂素B、爵床脂素B、金不換萘酚甲醚、臺(tái)灣脂素E甲醚、6'-羥基爵床脂素C和新爵床辛A7種成分的含量。建立基于相對(duì)校正因子同時(shí)測(cè)定以上7種木脂素含量的方法。（2）采用不同包裝材料對(duì)爵床藥材進(jìn)行儲(chǔ)藏實(shí)驗(yàn)，結(jié)合已建立的相對(duì)校正因子，考察多個(gè)木脂素成分的含量變化情況。以傳統(tǒng)不包裝堆放為對(duì)照，考察分別以編織袋、塑料袋

3、、紙箱、麻袋、布袋包裝的同一批爵床藥材中木脂素類(lèi)成分在6個(gè)月內(nèi)的含量變化情況。（3）以爵床為研究對(duì)象，對(duì)其木脂素成分的提取工藝依次進(jìn)行單因素考察，正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，對(duì)提取因素和水平進(jìn)行優(yōu)化。另外，對(duì)大孔樹(shù)脂柱上柱條件逐一進(jìn)行考察，優(yōu)化大孔樹(shù)脂柱對(duì)爵床中木脂素成分的洗脫純化效果。
　　結(jié)果：（1）建立了基于相對(duì)校正因子同時(shí)測(cè)定爵床中7種木脂素含量的方法。以金不換萘酚甲醚為內(nèi)參物，其余6個(gè)成分對(duì)內(nèi)參物的相對(duì)校正因子依次為1.31、0.91

4、、0.89、1.40、0.87、1.10。不同儀器、不同色譜柱測(cè)得相對(duì)校正因子間的RSD(Relative Standard Deviation）小于2.5％。其余6個(gè)成分對(duì)內(nèi)參物的保留時(shí)間的比值即相對(duì)保留值依次為0.663、0.737、0.806、0.906、1.117、1.205。不同儀器、不同色譜柱測(cè)定相對(duì)保留值間的RSD小于2%。對(duì)10批不同產(chǎn)地的爵床藥材分別采用外標(biāo)一點(diǎn)法（測(cè)定法）和相對(duì)校正因子計(jì)算法（計(jì)算法）進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果利

5、用t檢驗(yàn)進(jìn)行比較，結(jié)果表明以相對(duì)校正因子測(cè)得的結(jié)果與常規(guī)的含量測(cè)定方法測(cè)得的結(jié)果之間無(wú)顯著性差異（P>0.05）。（2）考察了6種儲(chǔ)藏方式的爵床藥材在儲(chǔ)藏期內(nèi)木脂素成分含量變化情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用統(tǒng)計(jì)學(xué)t檢驗(yàn)對(duì)其進(jìn)行具體分析。實(shí)驗(yàn)比較了儲(chǔ)藏過(guò)程中各個(gè)化合物在不同包裝材料與選定對(duì)照之間的含量差異。另外，比較了各個(gè)化合物在儲(chǔ)藏6個(gè)月后與儲(chǔ)藏實(shí)驗(yàn)前的含量變化差異。根據(jù)實(shí)驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)結(jié)果可知，儲(chǔ)藏6個(gè)月后，各成分的含量與實(shí)驗(yàn)前具有顯著性差異（P<0.

6、05），含量明顯降低。不同包裝材料與選定對(duì)照之間也存在差異，特別是用塑料袋和紙箱包裝的樣品中，所測(cè)目標(biāo)成分與選定對(duì)照樣品中的含量均有顯著性差異（P<0.05）。（3）采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)爵床中木脂素提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，最終確定了最佳提取工藝，優(yōu)化后提取工藝為：用10倍量70%乙醇提取兩次，每次提取1h。優(yōu)化后工藝對(duì)木脂素提出量高，達(dá)到預(yù)期優(yōu)化效果。另外，對(duì)大孔樹(shù)脂分離純化工藝進(jìn)行了考察，結(jié)果使用ADS-7型大孔樹(shù)脂的純化效果較好，所以選擇A

7、DS-7大孔樹(shù)脂，洗脫溶劑為95%乙醇，溶劑用量為10倍體積（BV）。
　　結(jié)論：本文建立了利用相對(duì)校正因子同時(shí)測(cè)定爵床藥材中7種木脂素類(lèi)成分的方法，方法準(zhǔn)確、可靠，操作簡(jiǎn)便，實(shí)現(xiàn)中藥多指標(biāo)含量同時(shí)測(cè)定，可以降低對(duì)照品的使用數(shù)量，同時(shí)也將大大降低分析檢測(cè)的成本和效率。另外，對(duì)爵床藥材不同儲(chǔ)藏方式對(duì)其主要成分含量變化進(jìn)行了研究，為藥材優(yōu)選、儲(chǔ)藏及安全有效使用提供了理論依據(jù)。同時(shí)對(duì)爵床藥材提取純化工藝進(jìn)行研究，為下一步新藥研發(fā)奠定了基