利用SSR標(biāo)記構(gòu)建水稻特征指紋及種子純度分析的研究.pdf

1、DNA分子標(biāo)記是隨分子生物學(xué)和生物技術(shù)的迅速發(fā)展而發(fā)展起來的一類新的較為理想的遺傳標(biāo)記。與形態(tài)標(biāo)記、細(xì)胞學(xué)標(biāo)記和生化標(biāo)記三類遺傳標(biāo)記技術(shù)比較，它具有獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用DNA分子標(biāo)記特別是SSR標(biāo)記鑒定水稻種子純度和品種真實(shí)性具有準(zhǔn)確可靠、經(jīng)濟(jì)簡便、迅速等優(yōu)點(diǎn)，正日益成為品種純度鑒定的發(fā)展趨勢(shì)。它可以為經(jīng)營者杜絕假冒種子上市和育種者品種權(quán)益保護(hù)提供有效的法律依據(jù)。 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用SSR標(biāo)記對(duì)19份水稻材料進(jìn)行特征DNA指紋篩選和純度鑒定

2、，并與田間種植材料進(jìn)行單株對(duì)照實(shí)驗(yàn)。結(jié)果如下： (1)從水稻的12條染色體上隨機(jī)挑選了60對(duì)SSR引物進(jìn)行了篩選，有41對(duì)能夠在實(shí)驗(yàn)材料中顯示較好的多態(tài)性，占檢測(cè)引物的68.3％。其余18對(duì)不能擴(kuò)增出特異性條帶，1對(duì)無擴(kuò)增條帶，不符合純度鑒定和特征性DNA指紋構(gòu)建的要求。 (2)通過用41對(duì)引物對(duì)19個(gè)供試品種的PCR擴(kuò)增，得到了18個(gè)供試樣品的特征標(biāo)記，只有金山S-1未能找到其特征標(biāo)記。供試品種中的4個(gè)F1代都可以很好

3、地找到它們的特征指紋。在所篩選的引物中，各個(gè)引物的表現(xiàn)有所差別，有的可以擴(kuò)增出六種帶型，有的可以擴(kuò)增出五種或者四種條帶類型。 (3)供試材料中包括金山A-1和金山A-2、金山S-1和金山S-2等親緣關(guān)系較近的品種。在尋找可以區(qū)別它們的特征標(biāo)記時(shí)要通過篩選更多的引物才能做到，其篩選效率要低于親緣關(guān)系遠(yuǎn)的品種。篩選出的41對(duì)引物沒有一個(gè)可以擴(kuò)增出供試的19個(gè)品種的全部特征指紋。但是可以通過最少11對(duì)引物組合將它們區(qū)分開來。