山東產(chǎn)丹參抑菌活性及其評(píng)價(jià)方法研究.pdf

1、目的：丹參為常用中藥,化學(xué)成分眾多,且具有廣泛多樣的藥理活性,其脂溶性成分如隱丹參酮等具有明顯的抗炎、抗菌等作用,但在臨床上應(yīng)用很少,也極少作為脂溶性成分研究的檢測(cè)指標(biāo);此外,由于丹參質(zhì)量受生長(zhǎng)環(huán)境、氣候變化、種植技術(shù)、品種等多種因素影響,其脂溶性成分的含量有較大差異,因而抑菌活性也各不相同。本課題以山東不同產(chǎn)地的丹參藥材為研究對(duì)象,建立丹參藥材中含量較高的丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA和隱丹參酮3種主要脂溶性有效成分的含量測(cè)定方法,研究丹參抑菌

2、活性與產(chǎn)地的相關(guān)性,為合理開發(fā)利用丹參資源提供科學(xué)依據(jù);建立丹參微生物檢定法,用微生物檢定法評(píng)價(jià)丹參抑菌程度,以保證其質(zhì)量控制指標(biāo)與臨床療效相一致。
　　 方法：本課題首先以最低抑菌濃度為評(píng)價(jià)指標(biāo),檢測(cè)了丹參乙醇提取液對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞桿菌、短小芽孢桿菌、白色念珠菌的最低抑菌濃度,并分別考察了提取方式、滅菌方式以及不同pH值的丹參提取液對(duì)其抑菌活性的影響;采用高效液相色譜法,建立了同時(shí)測(cè)定隱丹

3、參酮、丹參酮ⅡA和丹參酮Ⅰ三種脂溶性成分含量的方法,并對(duì)山東八個(gè)不同產(chǎn)區(qū)的丹參藥材進(jìn)行了三種脂溶性成分的含量檢測(cè);采用管碟法,考察了隱丹參酮、丹參酮ⅡA和丹參酮Ⅰ三種丹參脂溶性成分對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌活性,通過(guò)與其脂溶性成分的含量對(duì)比,探討了丹參抑菌程度與其脂溶性成分的相關(guān)性;參照抗生素微生物檢定法,建立了丹參微生物檢定法,并測(cè)定了山東三個(gè)產(chǎn)區(qū)的丹參藥材的效價(jià)。
　　 結(jié)果：數(shù)據(jù)顯示,丹參乙醇提取液對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌

4、、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞桿菌、短小芽孢桿菌均具有抑制作用,其最低抑菌濃度(MIC)分別為:20mg/mL、20mg/mL、40mg/mL、80mg/mL、80mg/mL。加熱回流1小時(shí)提取物,抑菌效果較好,而不同pH值和不同滅菌方式,對(duì)丹參的抑菌活性均無(wú)影響。采用高效液相色譜法,對(duì)山東八個(gè)不同產(chǎn)區(qū)的丹參藥材三種脂溶性成分的含量檢測(cè)結(jié)果顯示,不同產(chǎn)區(qū)的丹參藥材其三種脂溶性成分的含量各不相同,并且對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌活性也各不相同,隱丹

5、參酮含量高的丹參藥材其抑菌活性較高。建立了丹參對(duì)照藥材、隱丹參酮微生物檢定一劑量法的標(biāo)準(zhǔn)曲線,并應(yīng)用該方法對(duì)山東沂源悅莊、新泰、泗水楊柳等三地的紫花丹參進(jìn)行效價(jià)測(cè)定,其效價(jià)分別為:1352.82u/mL、1383.41u/mL、422.09u/mL。
　　 結(jié)論：不同產(chǎn)區(qū)丹參脂溶性成分的含量不同,其抑菌活性不同,抑菌活性與其脂溶性成分的含量相關(guān);丹參微生物檢定法可實(shí)現(xiàn)其質(zhì)量控制指標(biāo)與藥用療效的相關(guān)性,為丹參抑菌作用在臨床上的應(yīng)用