抗白粉病小麥-簇毛麥種質(zhì)系的選育及其鑒定.pdf

1、本研究在對硬簇麥與Am3進(jìn)行形態(tài)學(xué)和細(xì)胞學(xué)鑒定的基礎(chǔ)上，綜合運(yùn)用形態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)等方法，從二者的雜種后代中進(jìn)行了種質(zhì)系的篩選鑒定，主要獲得以下結(jié)果： 1.對硬簇麥與Am3的雜種后代進(jìn)行白粉病抗性鑒定，從中篩選出對白粉病高抗或免疫的種質(zhì)系17個，分別編號為山農(nóng)030701、山農(nóng)030702、山農(nóng)030703、山農(nóng)030704、山農(nóng)030705、山農(nóng)030706、山農(nóng)030708、山農(nóng)030711、山農(nóng)030713、山農(nóng)0

2、30714、山農(nóng)030502、山農(nóng)030503、山農(nóng)030506、山農(nóng)030507、山農(nóng)030510、山農(nóng)030512、山農(nóng)030513。其中山農(nóng)030714、山農(nóng)030502和山農(nóng)030513對白粉病表現(xiàn)高抗，其余皆表現(xiàn)免疫。形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果表明它們的形態(tài)特征都明顯不同于雙親。 2.對篩選出的17個抗白粉病種質(zhì)系進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定，結(jié)果表明，其根尖細(xì)胞染色體數(shù)目都是42；其中16個種質(zhì)系的花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂中期Ⅰ可以觀察到單價(jià)體或者

3、多價(jià)體，只有在種質(zhì)系山農(nóng)030713的花粉母細(xì)胞中未觀察到單價(jià)體或多價(jià)體，其染色體構(gòu)型為2n=21Ⅱ，表明其在細(xì)胞學(xué)上是穩(wěn)定的。 3.進(jìn)一步將穩(wěn)定抗病種質(zhì)系山農(nóng)030713與普通小麥雜交，對雜種F1花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂中期Ⅰ的染色體構(gòu)型進(jìn)行分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，多數(shù)細(xì)胞中形成21個二價(jià)體，且常有四價(jià)體出現(xiàn)，說明種質(zhì)系山農(nóng)030713中可能存在染色體的結(jié)構(gòu)變異。 4.隨機(jī)選取D基組7條染色體上的特異SSR引物，對硬簇麥、山農(nóng)030

4、713、Am3及中國春缺體-四體系N1DT1B、N2DT2A、N3DT3A、N4DT4B、N5DT5B、N7DT7B和中國春端體系6DL(N6DS)、6DS(N6DL)進(jìn)行分析，結(jié)果，引物Xgdm126-1D、BARC159-2DL、Xgwm341-3D、Xgdm129-4D、Xgwm654-5D、Xgdm36-6D、BARC183-6DS和Xgwm44-7D分別在山農(nóng)030713和Am3中擴(kuò)增出了長度分別約為220bp、230bp、1

5、20bp、150bp、130bp、150bp、180bp、200bp的特異帶，而硬簇麥和相對應(yīng)的缺體或端體缺少這些帶。這表明山農(nóng)030713含有D基組的全部7條染色體。 5.以簇毛麥、硬簇麥、山農(nóng)030713和Am3為材料，選用150對SSR引物對其進(jìn)行了分析。結(jié)果表明，在供試的150對引物中，有一對引物Xgwm99-1A可以在簇毛麥、硬簇麥和山農(nóng)030713中穩(wěn)定地?cái)U(kuò)增出一條長約120bp的特異帶，而Am3中缺少此帶，說明山農(nóng)

6、030713中有來自簇毛麥的遺傳物質(zhì)，并且該特異帶可作為識別山農(nóng)030713的特異標(biāo)記。據(jù)此推測，種質(zhì)系山農(nóng)030713中有簇毛麥遺傳物質(zhì)的滲入，是一個小麥-簇毛麥漸滲系。 以簇毛麥基因組總DNA為探針，硬簇麥作為對照，對種質(zhì)系山農(nóng)030713進(jìn)行原位雜交。結(jié)果顯示，硬簇麥中有14條來自簇毛麥染色體，種質(zhì)系山農(nóng)030713中未觀察到雜交信號。多次重復(fù)得到相同的結(jié)果。這可能由于來自簇毛麥的染色體片斷較小，用基因組原位雜交不易鑒定的