殼寡糖螯合鉻的制備及其對糖尿病小鼠的降糖研究.pdf

1、糖尿病(diabetes mellitus)是一種代謝紊亂，其特點(diǎn)是高血糖、糖代謝、脂肪代謝、蛋白質(zhì)代謝紊亂，并且與胰島素分泌缺陷和/或胰島素絕對或相對分泌不足有關(guān)。鉻是人體必須的微量元素，在人和動(dòng)物體內(nèi)起到了維持正常糖代謝，清除和抑制體內(nèi)自由基的作用。殼寡糖(Chitooligosaccharides，COS)是殼聚糖的降解產(chǎn)物，其具有分子量小，溶于水，可被人體、動(dòng)物及植物體吸收利用等特點(diǎn)，在糖尿病的防治研究方面有潛在的應(yīng)用價(jià)值。

2、r>　　 本試驗(yàn)以殼寡糖與無機(jī)鉻(CrCl3·6H2O)為原料，通過控制反應(yīng)質(zhì)量比、pH值、溫度和時(shí)間，合成制備出殼寡糖螯合鉻。其最高產(chǎn)率為54.86％，通過紅外光譜(FT/IR)分析，Cr3+可能與殼寡糖分子中的氨基和羥基發(fā)生反應(yīng)。為了進(jìn)一步探討殼寡糖螯合鉻的降血糖功能，選擇昆明種雄性小白鼠進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)，研究了殼寡糖螯合鉻對糖尿病小鼠降血糖、降血脂及肝臟、腎臟、脾臟損傷修復(fù)的影響。
　　 研究殼寡糖螯合鉻對糖尿病小鼠血糖和血

3、脂的影響，選擇10只昆明種雄性小白鼠(20±2g)作為正常對照組。選65只昆明種雄性小白鼠(20±2g)進(jìn)行下面的試驗(yàn)。對這些小白鼠采用腹腔注射四氧嘧啶(100mg/kg·bw)，建立糖尿病小鼠模型，連續(xù)兩天。三天后，血糖值大于13.8mmol/L，被視為造模成功者。從造模成功的糖尿病小鼠中選中30只隨機(jī)分為糖尿病對照組、殼寡糖組和殼寡糖螯合鉻組，每組10只。四周后進(jìn)行血糖和血脂的測定。
　　 飼料添加0.7g/kg的殼寡糖和殼

4、寡糖螯合鉻，每周測定攝食量、飲水量及體重的變化。體重結(jié)果表明，糖尿病對照組試驗(yàn)開始后體重逐漸下降，4w結(jié)束時(shí)與正常對照組相比下降11.47g，差異極顯著(P<0.01)。殼寡糖組試驗(yàn)開始后，前2w體重下降，3w體重上升，試驗(yàn)4w時(shí)，與糖尿病對照組相比增加了4.52g，差異極顯著(P<0.01)。殼寡糖螯合鉻組試驗(yàn)開始后，1w時(shí)體重下降，2w開始體重上升，試驗(yàn)4w時(shí)，與糖尿病對照組相比增加了7.86g，差異極顯著(P<0.01)。攝食量試

5、驗(yàn)結(jié)果表明，糖尿病對照組試驗(yàn)開始后，攝食量逐漸增加。試驗(yàn)開始1w，糖尿病對照組、殼寡糖組、殼寡糖螯合鉻組均有所增加。試驗(yàn)開始2w，攝食量均有增加，但組間差異不顯著，第3w開始，與糖尿病對照組相比殼寡糖螯合鉻組攝食量減少1.76g，差異極顯著(P<0.01)。飲水量試驗(yàn)結(jié)果與攝食量有相同趨勢。血糖試驗(yàn)結(jié)果表明，糖尿病對照組試驗(yàn)開始后，血糖水平逐漸增加。試驗(yàn)開始2w時(shí)，殼寡糖螯合鉻組與糖尿病對照組相比血糖下降了1.66mmol/L，差異顯著

6、(P<0.05)，3w時(shí)，殼寡糖組與糖尿病對照組相比血糖下降了1.50mmol/L，差異顯著(P<0.05)，試驗(yàn)4w時(shí)，與糖尿病對照組相比，殼寡糖組和殼寡糖螯合鉻組分別下降了3.44mmol/L和4.29mmol/L，均有顯著差異(P<0.05，P<0.01)。同時(shí)這兩組小鼠血清總膽固醇含量也明顯下降，差異顯著(P<0.05)，但是它們的甘油三酯含量下降差異不明顯(P>0.05)。
　　 本試驗(yàn)研究殼寡糖螯合鉻對糖尿病小鼠肝臟

7、、腎臟和脾臟的保護(hù)作用。將各組小鼠飼喂四周后，斷頸處死，分別取其肝臟、腎臟、脾臟測定臟器系數(shù)，然后置于Bouin液中進(jìn)行固定，制作石蠟切片，然后對各組小鼠的肝臟、腎臟和脾臟進(jìn)行HE染色。
　　 試驗(yàn)結(jié)果顯示，殼寡糖螯合鉻對糖尿病小鼠的肝臟、腎臟、脾臟均有保護(hù)作用，并且可以增加脾臟系數(shù)和脾臟指數(shù)，降低肝臟和腎臟系數(shù)。與糖尿病對照組相比，殼寡糖螯合鉻組小鼠的腎臟系數(shù)和肝臟有不同程度降低，分別降低了1.24％和0.21％，均有顯著差異

8、(P<0.01，P<0.05)。而脾臟系數(shù)升高了0.05％，脾臟指數(shù)升高1.33g/mg，均有顯著差異(P<0.05)。
　　 糖尿病對照組小鼠肝臟病理學(xué)組織切片觀察顯示，肝細(xì)胞索排列混亂，肝細(xì)胞索間纖維細(xì)胞增生，在中央靜脈周圍，有大量的炎細(xì)胞侵潤現(xiàn)象。殼寡糖螯合鉻組肝細(xì)胞索狀結(jié)構(gòu)清晰，肝細(xì)胞索間增生的纖維細(xì)胞數(shù)量減少，肝細(xì)胞有輕微的顆粒變形現(xiàn)象發(fā)生。從糖尿病對照組小鼠腎臟病理學(xué)組織切片觀察可知，腎小球基底膜明顯增厚，細(xì)胞外基質(zhì)