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1、目的:研究富氫University of Wisconsin器官保存液(HRUW)對(duì)離體大鼠腎臟低溫保存期損傷的影響及相關(guān)機(jī)制。
方法:將H2加入U(xiǎn)W液中制成富氫UW液(HRUW)。采用隨機(jī)數(shù)字表法,將24只Wistar大鼠隨機(jī)分為3組:正常對(duì)照組、UW液保存組和HRUW液保存組,每組8只。依照大鼠腎移植供腎摘取方法取下大鼠左腎。正常對(duì)照組(C組):大鼠腎臟取下后不進(jìn)行保存,直接取樣、凍存;UW液保存組(UW組):將大鼠腎
2、臟于4℃UW液中保存48 h;HRUW液保存組(HRUW組):將腎臟于4℃HRUW液中保存48 h。分別于冷保存后觀察各組大鼠腎臟組織形態(tài)學(xué)變化,進(jìn)行腎小管損傷評(píng)分,分析各組腎臟組織損傷程度;檢測(cè)腎臟組織中丙二醛(MDA)的含量及錳超氧化物歧化酶(Mn-SOD)的活性,評(píng)價(jià)腎臟組織氧化應(yīng)激損傷情況;實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)各組大鼠腎臟組織血紅素加氧酶1(HO-1)的mRNA表達(dá)情況;免疫印跡方法檢測(cè)腎臟組織HO-1蛋白表達(dá)情況;檢測(cè)
3、腎臟組織caspase3的活性,TUNEL法檢測(cè)腎臟組織細(xì)胞凋亡情況。數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理。
結(jié)果:冷保存48h后,HRUW組大鼠腎臟組織病理改變較UW組明顯減輕,腎小管損傷評(píng)分明顯降低(P<0.05);與UW組相比,HRUW組大鼠腎臟組織內(nèi)MDA含量明顯降低(P<0.01),Mn-SOD活性升高(P<0.05)。UW組腎組織腎小管細(xì)胞凋亡數(shù)明顯增加,caspase3活性增強(qiáng)(P<0.01);與UW組相
4、比,HRUW組腎小管細(xì)胞凋亡數(shù)明顯減少(P<0.05),caspase3活性明顯降低(P<0.01)。與對(duì)照組相比,UW組腎臟組織內(nèi)HO-1的mRNA表達(dá)明顯下調(diào),HO-1蛋白量表達(dá)減少;HRUW組腎臟組織內(nèi)HO-1的mRNA及蛋白表達(dá)量均較UW組增加。
結(jié)論:富氫UW液減輕離體大鼠腎臟低溫保存期損傷,其機(jī)制可能與氫氣(H2)抑制冷保存腎臟氧化應(yīng)激反應(yīng),減輕冷保存腎臟細(xì)胞凋亡有關(guān),HO-1的誘導(dǎo)表達(dá)增加可能是其保護(hù)機(jī)制之一
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