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文檔簡介
1、目的:增生性瘢痕嚴(yán)重影響患者的美觀及功能,但它的防治仍是燒傷整形外科學(xué)領(lǐng)域的重要難題。本研究通過觀察羥基喜樹堿對成纖維細(xì)胞膠原蛋白合成及細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制子Smad7表達(dá)影響,以期了解羥基喜樹堿抑制瘢痕作用機(jī)制。
方法:人增生性瘢痕標(biāo)本取自本院整形患者,采用組織塊法體外培養(yǎng)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞。(1)選取羥基喜樹堿63,125,250,500,1000ng/ml共五個(gè)濃度梯度,采用ELISA法分別在24、48、72小時(shí)后檢
2、測細(xì)胞上清液中Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白量。(2)125、250、500ng/ml濃度的羥基喜樹堿作用瘢痕細(xì)胞24h后,采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)及蛋白印跡法(Western blot)分別觀察Smad7mRNA及蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:(1)與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組各濃度(63,125,250,500,1000ng/ml)羥基喜樹堿均抑制增生性瘢痕成纖維細(xì)胞Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的分泌,且隨著藥物濃度增加,抑制作用增強(qiáng),與作用時(shí)間
3、無明顯相關(guān)。(2)實(shí)驗(yàn)組各濃度HCPT作用24小時(shí)后Smad7mRNA表達(dá)分別為0.350±0.037、0.431±0.054、0.616±0.038,與對照組(0.215±0.020)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Smad7蛋白表達(dá)分別為0.431±0.027、0.540±0.043、1.186±0.148,與對照組(0.280±0.033)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這說明,各濃度HCPT干預(yù)后增生性瘢痕成纖維
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