中藥寒熱性代謝組學判別模式的建立研究.pdf

1、目的:
　　中藥藥性理論是傳統(tǒng)中醫(yī)藥學的核心內(nèi)容,其中寒熱藥性更是占據(jù)其主導地位。傳統(tǒng)的中藥藥性理論多源于經(jīng)驗,目前的中藥現(xiàn)代化的研究多基于在西藥學植物化學及天然藥物化學理論指導下的單體成分研究,而較少涉及以中醫(yī)藥學自身思維特點為基礎,從藥性方面入手進行系統(tǒng)研究。代謝組學作為系統(tǒng)生物學的新興學科,其借助代謝組學技術整體系統(tǒng)的研究方式與中醫(yī)藥學傳統(tǒng)理論相符合。本研究擬根據(jù)傳統(tǒng)中藥的四氣分類,選取寒熱藥性為研究代表,探索寒熱不同藥性的

2、中藥作用于生物體內(nèi)引起的代謝產(chǎn)物的變化。根據(jù)這些變化,尋找藥物寒熱藥性與代謝產(chǎn)物變化的關系,在此基礎上篩選出具有寒熱藥性的特征性的候選代謝產(chǎn)物,并建立可用于鑒定中藥寒熱藥性的特征性的判別模式,為中藥藥性判定提供確切的分子理論基礎,并可用于中藥學新藥的開發(fā)及藥性鑒定,對丁中藥現(xiàn)代化研究的思維模式轉(zhuǎn)變具有一定的促進作用,為中西醫(yī)結(jié)合用藥提供更為可靠的理論依據(jù)。
　　材料與方法:
　　1.中藥給藥前后大鼠血清采集:選取19味中藥單

3、藥顆粒,根據(jù)藥物四氣分為熱、寒兩組,寒性藥物組含10味藥材,熱性藥物組含9味藥材,同時設立溶劑對照組及窄白對照組。將SD大鼠在相同條件下飼養(yǎng)6天后行眼眶靜脈叢取血,收集血清,作為給藥前對照樣本。取血后給予單藥灌胃7天,每日次,給藥量為人體常用劑量/人標準體重*20,劑量為2ml/只/天。于第7天給藥后兩小時再次眼眶靜脈叢取血,收集血清。
　　2.代謝組學分析:將給藥前后的血清經(jīng)過除蛋白、凍干等預處理之后,進行基于HPLC-TOFM

4、S(高效液相色譜-飛行時間質(zhì)譜)的血清全組分代謝組學分析。
　　3.將原始數(shù)據(jù)經(jīng)過R統(tǒng)計軟件,進行l(wèi)檢驗及PLS-DA分析判別,得到各種代謝物的相關信息,建立基于中藥寒熱藥性的代謝組學判別模型。
　　4.以t檢驗P值小于0.05為標準,確定不同組間比較所得差異代謝物化合物。
　　結(jié)果:
　　1.通過HPLC-TOF/MS檢測,可以有效并且系統(tǒng)檢測出中藥對于機體代謝層面的改變。
　　2.通過HPLC-TOF/

5、MS檢測,可檢測出寒熱不同藥性藥物引起機體的代謝改變。其中得到熱性藥物特異性改變代謝物41種,寒性藥物特異性改變代謝物30種。
　　3.通過PLS-DA方法可初步建立區(qū)分寒熱藥性差異的判別模型,該模型可解釋85.3％分類信息,模型預測能力為61.8％。
　　結(jié)論:
　　1.通過高效液相色譜-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用技術可以系統(tǒng)并且全面的檢測出中藥作用于機體引起的代謝層面的改變。
　　2.寒性藥物和熱性藥物作用于機體都存在