丹酚酸A通過抑制3羧基磷脂酰肌醇激酶(PI3K)途徑降低血小板激活和動脈血栓形成.pdf

1、目的:動脈粥樣硬化疾病是西方發(fā)達國家發(fā)病率和死亡率最高的疾病,而且也是我國主要的死亡原因。血小板在動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程中起著非常重要的作用。丹參是亞洲廣泛用于治療動脈粥樣硬化血栓性疾病的一種中藥,而丹酚酸A是其中的一種主要水溶性成分。本研究探索了丹酚酸A對血小板活性的影響及其可能的作用機制。
　　 方法和結(jié)果:重要的血小板激活刺激劑ADP,凝血酶,膠原和血栓烷A2類似物U46619所引起血小板聚集能被丹酚酸A顯著抑制,而且丹

2、酚酸A的抑制作用呈濃度依賴性。另外應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測單個血小板激活時,發(fā)現(xiàn)丹酚酸A對ADP和凝血酶刺激引起的P選擇素表達和纖維蛋白原結(jié)合有顯著的抑制作用。流式細胞術(shù)的檢測同時也證明丹酚酸A可以抑制血小板-白細胞聚集體的形成。丹酚酸A還可以抑制血小板在固定的纖維蛋白原上的鋪展,這說明丹酚酸A可以抑制血小板從外到內(nèi)的信號通路(Outside-in signaling)。在相當(dāng)于體內(nèi)動脈流速的剪切力(1000s-1)下,丹酚酸A可以抑制血小板

3、在固定膠原上的粘附,抑制率大概為40％。免疫印跡分析顯示,丹酚酸A抑制了血小板Akt的磷酸化,因此它的作用靶點可能是3羧基磷脂酰肌醇激酶(PI3K)。通過應(yīng)用PI3K的抑制劑LY294002和TGX-221進行對比和疊加實驗,證實了丹酚酸A的作用靶點是PI3K的β亞型。最后體外實驗的作用在我們體內(nèi)實驗得到了驗證。在體內(nèi)動脈血栓模型中,丹酚酸A可以顯著延長野生型小鼠腸系膜動脈血管堵塞的時間(對照組:35±2 min,丹酚酸A處理組:56±