丁苯酞對(duì)腦缺血大鼠海馬區(qū)HCY、CRP和IL-6水平的影響.pdf

1、目的:目前研究發(fā)現(xiàn)，VD的發(fā)生、發(fā)展與多種病理程序有關(guān)。有人認(rèn)為HCY本身對(duì)血管及凝血系統(tǒng)的毒性作用，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增生，抑制內(nèi)皮細(xì)胞的增生；誘導(dǎo)單核細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞等。綜上，高HCY血癥在腦血管疾病的病中所起的作用越來越被認(rèn)識(shí)，但還需更深刻的研究。
　　 C-反應(yīng)蛋白在生理濃度下促進(jìn)血管細(xì)胞和細(xì)胞內(nèi)粘附分子的正確表達(dá)。但在急性炎癥反應(yīng)時(shí)期，血中CRP會(huì)迅速增加至正常血清中含量的1000倍以上。研究證實(shí)CRP不僅是炎癥的一

2、種指標(biāo)，其本身也參與了炎癥反應(yīng)的過程，且有致動(dòng)脈粥樣硬化的作用。
　　 正常較低濃度IL-6發(fā)揮中樞免疫介導(dǎo)、神經(jīng)修復(fù)等生理作用，而缺血狀態(tài)下高濃度的炎性細(xì)胞因子IL-6可能參與神經(jīng)損傷。總之，IL-6水平影響腦缺血的病情及預(yù)后。
　　 在VD大鼠模型中，是否同時(shí)存在HCY、CRP和IL-6水平的變化及三種指標(biāo)之間的關(guān)系，以及丁苯酞膠囊能否阻斷慢性缺血性腦損傷中的多個(gè)病理環(huán)節(jié)，本實(shí)驗(yàn)通過建立血管性癡呆大鼠模型，分別測(cè)定海

3、馬區(qū)HCY、CRP和IL-6的水平，進(jìn)一步探討丁苯酞治療VD的藥理機(jī)制。
　　 方法:
　　 第一部分：以SD老齡雄性大鼠為研究對(duì)象，隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、丁苯酞組。應(yīng)用雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久結(jié)扎法，結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈的遠(yuǎn)近心端，并從中間剪斷來制備VD動(dòng)物模型，造模術(shù)后4周丁苯酞組給予丁苯酞軟膠囊200mg/kg只，每日灌胃(丁苯酞用花生油稀釋至2m1)，一日一次，共四周；同時(shí)假手術(shù)組和模型組則給予等量的花生油灌胃，每日一次

4、，共四周。各組大鼠分別于灌胃四周后應(yīng)用MG-2Y-型迷宮實(shí)驗(yàn)對(duì)其進(jìn)行學(xué)習(xí)和記憶能力測(cè)試。第二部分：分別進(jìn)行HE染色和NISSL染色，并觀察各組大鼠海馬組織的病理變化，采用ELISA法測(cè)定HCY，用SP等免疫組化技術(shù)，觀察各組大鼠海馬區(qū)組織CRP和IL-6的表達(dá)變化；
　　 結(jié)果:
　　 1、Y迷宮實(shí)驗(yàn)：模型組大鼠的學(xué)習(xí)及記憶能力均明顯下降，與模型組和丁苯酞組相比，假手術(shù)組學(xué)習(xí)達(dá)標(biāo)所需電擊次數(shù)最少，而正確記憶次數(shù)最多；丁苯

5、酞組較模型組學(xué)習(xí)和記憶能力有所改善。
　　 2、HCY測(cè)定：模型組平均血漿Hcy水平明顯高于假手術(shù)組；有顯著性差異。
　　 3、HE染色：假手術(shù)組海馬區(qū)神經(jīng)元排列規(guī)則致密，數(shù)量最多，細(xì)胞核大且圓，核仁清晰；與假手術(shù)組相比，模型組海馬區(qū)神經(jīng)元結(jié)構(gòu)紊亂，數(shù)目最少，排列最松，細(xì)胞核固縮，深染，胞漿周圍還有空暈；丁苯酞組神經(jīng)元較模型組有所改善。
　　 4、NISSL染色：假手術(shù)組神經(jīng)元清晰，細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，胞漿中布滿了深藍(lán)

6、色呈顆粒狀的尼氏體；模型組細(xì)胞皺縮變形，體積變小，胞漿尼氏體著色淺淡；丁苯酞組較模型組有所改善。
　　 5、SP免疫組化CRP的變化：CRP的陽性表達(dá)產(chǎn)物顯示黃色，位于細(xì)胞漿及細(xì)胞核內(nèi)。模型組可見細(xì)胞漿和細(xì)胞核內(nèi)有大量的棕黃色顆粒，染色較深；而假手術(shù)組CRP陽性細(xì)胞數(shù)目減少，著色變淡，丁苯酞組陽性細(xì)胞較模型組減少，染色變淺。
　　 6、SP免疫組化IL-6的表達(dá)：細(xì)胞胞漿中棕黃色顆粒者為陽性細(xì)胞。模型組著色最重，可見大量