艾附暖宮膠囊的制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及穩(wěn)定性試驗(yàn)研究.pdf

1、艾附暖宮丸由艾葉、香附（醋制）等組成，具有理氣補(bǔ)血、暖宮調(diào)經(jīng)的功效，用于治療子宮虛寒、月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)來腹痛、腰酸帶下等病癥。本課題通過優(yōu)化設(shè)計(jì)，將丸劑制成膠囊劑，制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)研究。
　　 目的：
　　 1.利用正交試驗(yàn)優(yōu)選揮發(fā)油的提取工藝、水提、醇提工藝、揮發(fā)油包合工藝，制成膠囊劑。
　　 2.采用高效液相色譜法，建立芍藥苷和吳茱萸次堿的含量測定方法。
　　 3.采用薄層色譜法，建立香附（醋

2、制）、吳茱萸（制）、白芍（酒炒）、炙黃芪的定性鑒別方法。
　　 4.采用加速試驗(yàn)的方法，進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)研究。
　　 方法：
　　 1.采用正交試驗(yàn)篩選制備工藝。(1)以浸泡時(shí)間、提取時(shí)間、加水倍數(shù)作為考察因素，混合揮發(fā)油的收率為指標(biāo)，優(yōu)選香附（醋制）、當(dāng)歸、川芎、續(xù)斷、吳茱萸（制）的揮發(fā)油提取工藝；以提取時(shí)間、加水倍數(shù)、粉碎粒度作為考察因素，揮發(fā)油的收率為指標(biāo)，優(yōu)選肉桂揮發(fā)油的提取工藝；(2)以提取次數(shù)、提取時(shí)間

3、、加水倍數(shù)作為考察因素，以多糖含量、出膏率綜合評(píng)分為指標(biāo)優(yōu)選肉桂（藥渣）、艾葉（炭）、地黃、炙黃芪的水提工藝；(3)以提取次數(shù)、提取時(shí)間、溶劑用量、乙醇濃度作為考察因素，以吳茱萸堿、吳茱萸次堿含量的綜合評(píng)分為指標(biāo)，優(yōu)選香附（醋制）、當(dāng)歸、川芎、續(xù)斷、吳茱萸（制）的醇提工藝；(4)以揮發(fā)油和環(huán)糊精的比例、包合溫度和包合時(shí)間作為考察因素，以包合物收率和包合率的綜合評(píng)分為指標(biāo)，優(yōu)選揮發(fā)油的包合工藝。
　　 2.定性鑒別
　　

4、(1)白芍（酒炒）的鑒別：使用硅膠G薄層板，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5：10:0.2)為展開劑，噴以5％的香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。
　　 (2)吳茱萸（制）的鑒別：使用硅膠G薄層板，以正丁醇-醋酸-水(2:1:1)為展開劑，在紫外光燈(365nm)下檢視。
　　 (3)香附（醋制）的鑒別：使用硅膠GF254薄層板上，以苯-乙酸乙酯(19：1)為展開劑，在紫外光燈(254nm)下檢視。
　

5、　 (4)炙黃芪的鑒別：使用硅膠G薄層板，以三氯甲烷-甲醇-水(13：7：2)為展開劑，噴以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加熱活化10分鐘，在紫外光燈(365nm)下檢視。
　　 3.含量測定
　　 (1)高效液相色譜法：分別檢測芍藥苷和吳茱萸次堿的含量。參考文獻(xiàn)選擇合適的固定相，調(diào)整流動(dòng)相組成、配比、流速以及柱溫，在最大吸收波長下測定，使指標(biāo)峰分離完全，理論塔板數(shù)符合要求。
　　 (2)線性范圍考察：配制系列

6、濃度的對(duì)照品溶液，以色譜峰的峰面積為縱坐標(biāo)，以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得回歸曲線并考察線性范圍。
　　 (3)方法學(xué)考察：分別考察測定方法的精密度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和加樣回收率。
　　 (4)樣品含量測定：取三批樣品分別按上述方法測定指標(biāo)成分的含量。
　　 4.穩(wěn)定性試驗(yàn)研究
　　 按加速試驗(yàn)法對(duì)三批樣品進(jìn)行制劑穩(wěn)定性研究，分別于第1、2、3、6月末采樣，按膠囊劑重點(diǎn)考察項(xiàng)目進(jìn)行考察。
　　

7、 結(jié)果：
　　 1.通過正交試驗(yàn)篩選的最佳工藝為：(1)肉桂揮發(fā)油提?。核幉牧皆?mm～10mm，加水8倍，提取7小時(shí)；(2)香附（醋制）、吳茱萸（制）、當(dāng)歸、川芎、續(xù)斷揮發(fā)油的提取工藝為：浸泡1小時(shí)，加水8倍，提取7小時(shí)；(3)當(dāng)歸（半量）、地黃、炙黃芪、肉桂（藥渣）水提最優(yōu)提取條件為加水10倍，提取3次，每次1.5小時(shí)；(4)香附（醋制）、吳茱萸（制）、當(dāng)歸、川芎、續(xù)斷醇提工藝：乙醇濃度為70％，加10倍量，提取3次，每次

8、1.5小時(shí)；(5)包合工藝：β-環(huán)糊精：揮發(fā)油8:1，包合溫度50℃，包合時(shí)間1.0小時(shí)；(6)膠囊的制備：提取液濃縮成浸膏，加入當(dāng)歸（半量）、白芍（酒炒）細(xì)粉，拌膏，80℃烘干，破碎成40目顆粒，揮發(fā)油用β-環(huán)糊精包合后，與之混勻，裝入0號(hào)膠囊，每粒0.5克。
　　 2.定性鑒別：白芍（酒炒）、吳茱萸（制）、香附（醋制）、炙黃芪的TLC圖譜清晰，樣品溶液在與對(duì)照品溶液相同位置上，均顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照顯示無干擾。

9、　　 3.含量測定
　　 (1)吳茱萸次堿色譜條件為：Thermo(200mm×4.6mm，5μm)色譜柱，流動(dòng)相：0.04％辛烷磺酸鈉-乙腈(45:55)，流速0.8ml/min，柱溫25℃，檢測波長345nm?；貧w曲線為：y=13656c+8602097，r為0.9998，吳茱萸次堿在8.52ug/ml-85.2ug/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。該方法精密度、重現(xiàn)性、在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性和加樣回收率的RSD分別為0.37％、1.

10、34％、1.24％、0.41％，加樣回收率為99.6％，樣品中吳茱萸次堿的含量不低于0.067mg/粒。
　　 (2)芍藥苷的色譜條件為：Thermo(200mm×4.6mm，5μm)色譜柱，流動(dòng)相：0.1％磷酸-乙腈(88:12)，流速0.8ml/min，柱溫20℃，檢測波長230nm?；貧w曲線為：y=25346c+17127，r=0.9997，芍藥苷在12.216Yg/ml-122.16μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。該方法精

11、密度、重現(xiàn)性、在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性和加樣回收率的RSD分別為0.26％、0.36％、1.74％、0.41％，加樣回收率為99.6％，樣品中芍藥苷的含量不低于1.10mg/粒。
　　 4.穩(wěn)定性試驗(yàn)
　　 加速試驗(yàn)6個(gè)月，本品性狀、水分、崩解時(shí)限、含量無明顯差異。
　　 結(jié)論：確定了艾附暖宮膠囊的制備工藝，該工藝穩(wěn)定、可行。建立的薄層鑒別方法專屬性強(qiáng)，斑點(diǎn)清晰，可準(zhǔn)確鑒別制劑中的藥味成分；以較為公認(rèn)的有效成分作為含量