酪絲亮肽對(duì)肝癌肺轉(zhuǎn)移的治療作用.pdf

1、目的:
　　 觀察三肽化合物酪絲亮肽（Tyroserleutide，YSL）對(duì)人肝癌細(xì)胞肺轉(zhuǎn)移的抑制作用，初步探討其抑制肝癌細(xì)胞肺轉(zhuǎn)移的機(jī)制。
　　 方法:
　　 1.采用尾靜脈接種人肝癌細(xì)胞的方法建立裸鼠肝癌細(xì)胞的肺轉(zhuǎn)移模型來(lái)觀察YSL對(duì)肝癌細(xì)胞肺轉(zhuǎn)移的抑制作用。
　　 2.應(yīng)用Transwell小室實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ陀^察不同濃度的肺組織粗提物對(duì)肝癌細(xì)胞MHCC97H和SK-HEP-1的誘導(dǎo)能力，尋找最佳誘導(dǎo)濃度

2、。
　　 3.應(yīng)用Transwell小室實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ陀^察YSL對(duì)肺組織粗提物誘導(dǎo)的體外培養(yǎng)的兩種人肝癌細(xì)胞株侵襲能力的影響。
　　 4.應(yīng)用明膠酶譜分析法，觀察YSL對(duì)經(jīng)肺組織粗提物培養(yǎng)的兩種人肝癌細(xì)胞株細(xì)胞培養(yǎng)上清中基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs) MMP-2和MMP-9蛋白活性的影響。
　　 5.應(yīng)用免疫印跡技術(shù)觀察YSL對(duì)經(jīng)肺組織粗提物培養(yǎng)的兩種人肝癌細(xì)胞株細(xì)胞中M

3、MP-2和MMP-9蛋白表達(dá)的影響。
　　 6.應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法觀察YSL對(duì)經(jīng)肺組織粗提物培養(yǎng)的兩種人肝癌細(xì)胞株細(xì)胞中MMP-2和MMP-9 mRNA水平的影響。
　　 結(jié)果:
　　 1.YSL可以顯著抑制裸鼠體內(nèi)肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移至肺內(nèi)的腫瘤灶數(shù)。
　　 2.不同濃度肺組織粗提物誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞的移動(dòng)侵襲實(shí)驗(yàn)中，在一定濃度范圍內(nèi)隨著肺粗提物濃度的提高其穿過(guò)下室的細(xì)胞數(shù)增多，與培基對(duì)照組比較具有顯著差異。

4、
　　 3.YSL可以顯著抑制經(jīng)肺組織粗提物誘導(dǎo)的細(xì)胞的體外侵襲能力。
　　 4.YSL可以顯著抑制肝癌細(xì)胞培養(yǎng)上清中MMP-2和MMP-9的蛋白活性。
　　 5.YSL可以顯著抑制肝癌細(xì)胞中MMP-2和MMP-9的蛋白表達(dá)水平。
　　 6.YSL可以顯著抑制肝癌細(xì)胞中MMP-2和MMP-9的mRNA表達(dá)水平。
　　 結(jié)論:
　　 YSL具有抑制肝癌細(xì)胞肺轉(zhuǎn)移的作用。體外研究表明肺組織粗提