辛伐他汀對(duì)鼠平滑肌細(xì)胞脂質(zhì)蓄積及CXCL16表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察oxLDL對(duì)鼠源平滑肌細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的影響。觀察辛伐他汀對(duì)oxLDL誘導(dǎo)的鼠源平滑肌細(xì)胞脂質(zhì)蓄積與影響。觀察辛伐他汀對(duì)oxLDL誘導(dǎo)的泡沫細(xì)胞CXCL16表達(dá)的影響。 方法：采用體外培養(yǎng)的SD大鼠平滑肌細(xì)胞作為研究對(duì)象，換含0.1％血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)后加處理因素。 　　　Ⅰ.不同濃度的oxLDL(0、20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L)與鼠源平滑肌細(xì)胞共同孵育24h和用60mg/L oxLDL與

2、鼠源平滑肌細(xì)胞孵育不同時(shí)間即(0h、6h、12h、24h、36h)，油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積情況，高效液相色譜分析法檢測(cè)細(xì)胞總膽固醇蓄積情況，Western blotting檢測(cè)平滑肌細(xì)胞CXCL16蛋白質(zhì)的表達(dá)。 　　　Ⅱ.用60mg/L oxLDL與不同濃度的辛伐他汀(0uM、1uM、10uM、100uM)共同孵育24h，空白組作為對(duì)照組和用60mg/L oxLDL與最佳濃度的辛伐他汀100uM，同時(shí)孵育不同的時(shí)間即(0

3、h、6h、12h、24h), 空白組作為對(duì)照組, 油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積情況，高效液相色譜分析法檢測(cè)細(xì)胞總膽固醇蓄積情況，Western blotting檢測(cè)平滑肌細(xì)胞CXCL16蛋白質(zhì)的表達(dá)。 結(jié)果：Ⅰ.oxLDL誘導(dǎo)的鼠源平滑肌細(xì)胞脂質(zhì)蓄積與oxLDL呈劑量依賴性和時(shí)間依賴性(P<0.05)。.油紅O染色顯示：與空白對(duì)照組和低濃度組比較，較高濃度的oxLDL組(60mg/L、80mg/L)誘導(dǎo)平滑肌細(xì)胞較oxLDL低濃

4、度(20mg/L、40mg/L)組胞內(nèi)脂滴明顯增多，體積增大。oxLDL(60mg/L)較長(zhǎng)時(shí)間(24h、36h) 誘導(dǎo)平滑肌細(xì)胞比較短時(shí)間(0h、6h、12h) 胞內(nèi)脂滴明顯增多，體積增大。在oxLDL濃度為0、20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L時(shí)，HPLC檢測(cè)的CE/TC的比值分別為(10.78±1.25)％、(24.40±1.84)％、(35.6±2.47)％、(56.16±1.80)％(P<0.01) (57

5、.50±2.47)％, 在60mg/L的oxLDL作用的不同時(shí)間即(0h、6h、12h、24h、36h)，HPLC檢測(cè)的CE/TC的比值分別為(10.78±1.25)％、(23.78±1.80)％、(36.95±2.39)％、(55.39±2.22)％、(58.89±4.05)％(P<0.05)。 Ⅱ.辛伐他汀能抑制鼠源平滑肌細(xì)胞對(duì)oxLDL的攝取，油紅O染色可見oxLDL+simvastatin組細(xì)胞內(nèi)脂滴較oxLDL組明顯減

6、少，且脂滴顆粒體積變小。在oxLDL(60mg/L)與simvastatin濃度分別為(0uM、1uM、10uM、100uM)時(shí)，HPLC檢測(cè)的CE/TC的比值分別為(57.28±0.83)％、( 55.06±2.05)％、(46.20±1.44)％、( 17.86±0.97)％.正常組的CE/TC的比值為(10.78±1.25)％(P<0.05). 在oxLDL(60mg/L)與simvastatin(100uM)作用不同的時(shí)間組(0

7、h、6h、12h、24h)，HPLC檢測(cè)的CE/TC的比值分別為(57.28±0.83)％、(34.74±1.21)％、(25.96±1.31)％、(17.86±0.97)％(P<0.01). Ⅲ.在正常對(duì)照組和荷脂細(xì)胞(CE/TC<50％)組中，CXCL16蛋白表達(dá)無(wú)顯著差異性(P>0.05)，而在泡沫細(xì)胞(CE/TC>50％)組中，CXCL16蛋白表達(dá)顯著增加，CXCL16的表達(dá)與細(xì)胞泡沫化有關(guān)(p<0.05)。辛伐他汀能降