氨茶堿對(duì)哮喘鼠氣道平滑肌細(xì)胞增殖及TGF-β1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過(guò)建立慢性哮喘小鼠模型，探討轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)與氣道壁、平滑肌層厚度及氣道平滑肌細(xì)胞(ASMC)增殖的關(guān)系；觀察小劑量氨茶堿對(duì)TGF-β1表達(dá)及ASMC增殖的影響，并與地塞米松(DXM)的作用相比較。 方法：40只雌性清潔級(jí)BABL/c小鼠隨機(jī)分為4組(n=10)：對(duì)照組(A組)、哮喘組(B組)、氨茶堿干預(yù)組(C組)、DXM干預(yù)組(D組)。A組給予等量的Al(OH)<,3>磷酸鹽緩沖液(PBS)致敏及PB

2、S霧化激發(fā)；B、C、D組小鼠于第0、7、14 d給予[雞卵白蛋白(OVA)25 μg+AI(OH)<,3> 1 mg]PBS 0.2 ml腹腔注射致敏，第21～26 d每天1次霧2％的OVA，為哮喘急性期；第28～50 d隔天1次霧2％的OVA，為哮喘慢性期。在每次霧化前1 h，C、D組分別給予氨茶堿20 mg/kg及DXM 3 mg/kg腹腔注射干預(yù)，A、B組腹腔注射PBS對(duì)照。取左肺支氣管肺泡灌洗液(BALF)做細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，并用酶

3、聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法檢測(cè)上清液中活性TGF-β1的濃度；取右中肺組織做石蠟切片，行HE染色、TGF-β1和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)免疫組化染色，采用圖像分析軟件測(cè)定管腔基底膜周長(zhǎng)(Pbm)、氣管壁總面積(WAt)、氣道平滑肌面積(WAm)、ASMC核數(shù)(N)，結(jié)果以Pbm標(biāo)化，并測(cè)定TGF-β1在ASMC的灰度值。 結(jié)果：B組BALF中嗜酸粒細(xì)胞(EOS)百分比、活性TGF-β1濃度分別為(9.19±1.75)％、(

4、765.19±64.81)pg/ml，與A組[(1.27±0.53)％、(143.36±16.49)pg/ml]比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；C、D組分別為(4.81±0.72)％、(423.10±24.61)pg/ml，(2.04±0.67)％、(326.76±32.51)pg/ml，與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，C、D組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。圖像分析示：WAt/Pbm、WAm/Pbm、N/Pb

5、m B組分別為：(13.56±3.48)μm<'2>/μm、(5.03+1.24)μm<'2>/μm、(7.02±1.21)個(gè)/mm，與A組[(4.20±0.75)μm<'2>/μm、(1.16±0.51)μm<'2>/μm、(2.65±0.44)個(gè)/mm]比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；C、D組分別為(7.46±2.74)μm<'2>/μm、(2.39±0.60)μm<'2>/μm、(4.63±1.73)個(gè)/mm，(7.36±1

6、.40)μm<'2>/μm、(2.29±0.95)μm<'2>/μm、(3.58±1.05)個(gè)/mm，與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，C、D組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；灰度分析示：TGF.131在ASMC的灰度值B組為90.70±16.87，與A組57.92±5.35比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，C、D組分別為78.66±8.62、75.32±8.64，與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，C、D