利用細(xì)胞融合技術(shù)創(chuàng)造花生新種質(zhì)的基礎(chǔ)研究.pdf

1、對花生(ArachishypogaeaL.)組織培養(yǎng)不定芽誘導(dǎo)及再生條件進(jìn)行研究，并建立了其高效植株再生體系。結(jié)果表明：不定芽分化頻率因外植體種類、葉齡和切段部位及基因型的不同而異。幼葉明顯優(yōu)于上胚軸、下胚軸和子葉。幼葉中間切段優(yōu)于葉片頂端和葉片基部。適宜的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MSBs+1mg/LNAA+3～10mg/LBAP，再分化培養(yǎng)基為MSB5+10mg/LBAP或MSBs+3mg/LBAP+1mg/LABA。在上述培養(yǎng)基上相繼培養(yǎng)，花生

2、品種8823幼葉中間切段外植體分化不定芽頻率達(dá)91.6％以上。將形成不定芽的愈傷組織進(jìn)一步轉(zhuǎn)移至添加4mg/LBAP的培養(yǎng)基上，幼莖迅速伸長，再生植株頻率達(dá)100％。再生小植株轉(zhuǎn)移到新的基本培養(yǎng)基上生根，經(jīng)馴化后移至田間，正常開花結(jié)果。 對花生體細(xì)胞胚誘導(dǎo)及植株再生條件進(jìn)行研究。結(jié)果表明，Picloram對體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)效果優(yōu)于2,4-D和NAA；不同花生基因型體細(xì)胞胚誘導(dǎo)率有很大的差別。 對花生原生質(zhì)體分離和培養(yǎng)條件進(jìn)

3、行研究。分別利用花育20成熟胚萌發(fā)5～6d未展開的幼葉和幼葉培養(yǎng)誘導(dǎo)形成的胚性愈傷組織為材料分離原生質(zhì)體。為提高原生質(zhì)體產(chǎn)量和活力，對酶液組分進(jìn)行研究，結(jié)果表明，酶液含有2.0％纖維素酶(CellulaseRS)、0.2％果膠酶(PectolyaseY-23)、0.7mol/L甘露醇，并添加120mg/L抗壞血酸，酶解10h，原生質(zhì)體產(chǎn)量和活力最高。 對花生與其近緣野生種間細(xì)胞融合及培養(yǎng)方法進(jìn)行研究。將栽培種花生花育22體細(xì)胞胚