版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma)是我國(guó)南方省份及東南亞高發(fā)的一種惡性腫瘤,具有明顯的種族聚集性和地域性?,F(xiàn)在的研究認(rèn)為鼻咽癌是在多種因素協(xié)同作用下,經(jīng)過(guò)多步驟、多階段發(fā)生發(fā)展形成的,其發(fā)生可能與EBV病毒、理化環(huán)境因素、遺傳因素等有關(guān)。鼻咽癌具有頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移早、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移發(fā)生率高等特點(diǎn),但是目前對(duì)鼻咽癌侵襲和轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制尚不十分清楚。 Cavcolin-1(Cav-1,窖蛋白或小窩蛋白)是胞膜窖cave
2、olae的主要結(jié)構(gòu)蛋白,由細(xì)胞膜內(nèi)陷形成,與小泡運(yùn)輸,膽固醇穩(wěn)定和細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控相關(guān)。Cav-1在終末分化的細(xì)胞或者靜止的細(xì)胞中高表達(dá),包括脂肪細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等。以往的研究表明,Cav-1基因作為候選抑瘤基因在細(xì)胞的增殖中起負(fù)性調(diào)控的作用。然而,很多研究小組證實(shí),Cav-1在腫瘤轉(zhuǎn)移中高表達(dá)并能促進(jìn)腫瘤的發(fā)展。 采用pSIJPER.retro干擾載體系統(tǒng),構(gòu)建了針對(duì)caveolin-1(Cav-1)的RNA干擾載
3、體(shCav-1)。經(jīng)測(cè)序結(jié)果證實(shí)后,利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)將shCav-1導(dǎo)入具有成瘤、高轉(zhuǎn)移特性的5-8F鼻咽癌細(xì)胞株,經(jīng)嘌呤霉素篩選獲得抗性克??;RT-PCR結(jié)果表明,shCav-1表達(dá)載體特異性的引起Cav-1的表達(dá)下調(diào),Western Blot分析表明轉(zhuǎn)染了shCav-1的5-8F細(xì)胞中Cav-1的蛋白表達(dá)下調(diào)了95﹪以上,就此,我們已成功地建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染shCav-1的5-8F細(xì)胞株(5-8F-shCav-1)。 隨后,
4、我們進(jìn)一步考察了Cav-1的表達(dá)被干擾后對(duì)5-8F細(xì)胞的生物學(xué)特性的影響。流式細(xì)胞分析結(jié)果表明,轉(zhuǎn)染shCav-1后5-8F細(xì)胞明顯發(fā)生G0/G1期阻滯現(xiàn)象。 平板克隆形成實(shí)驗(yàn)和MTT比色法觀察5-8F-Cav-1細(xì)胞的增殖能力,以轉(zhuǎn)染pSIUPER.retro空白載體的5-8F細(xì)胞(5-8F-pSUPER.retro)作為對(duì)照,觀察5-8F-shCav-1細(xì)胞的增殖情況,結(jié)果表明5-8F-shCav-1細(xì)胞的增殖速度明顯低于對(duì)
5、照組。提示Cav-1被干擾后導(dǎo)致5-8F細(xì)胞的克隆形成能力和增殖能力降低。 利用Matrigel侵襲模型和劃痕實(shí)驗(yàn)證實(shí),Cav-1被干擾后5-8F細(xì)胞的侵襲能力和運(yùn)動(dòng)能力減弱。裸鼠腹腔內(nèi)接種后成瘤及轉(zhuǎn)移能力的比較分析結(jié)果進(jìn)一步提示,Cav-1被干擾后5-8F細(xì)胞的成瘤和轉(zhuǎn)移能力均下降。 本實(shí)驗(yàn)利用RNA干擾技術(shù),建立了穩(wěn)定表達(dá)shCav-1的干擾細(xì)胞株,成功地沉默了Cav-1基因在5-8F細(xì)胞中的表達(dá);Cav-1基因被干
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 利用鼻咽癌細(xì)胞與組織共培養(yǎng)模型探討候選鼻咽癌骨轉(zhuǎn)移相關(guān)基因.pdf
- 鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因表達(dá)譜的研究.pdf
- 候選腫瘤抑制基因DLC-1在鼻咽癌中的初步研究.pdf
- EBV與人鼻咽癌的基因表達(dá)譜并初步探討鼻咽癌轉(zhuǎn)移分子機(jī)制.pdf
- 鼻咽癌候選抑瘤基因NPCEDRG表達(dá)調(diào)控的初步研究.pdf
- 鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因fascin-1的功能及機(jī)制研究.pdf
- Tiam1基因在鼻咽癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及其相關(guān)信號(hào)通路的初步研究.pdf
- Caveolin-1調(diào)控肝細(xì)胞癌血管生成的初步研究.pdf
- 凋亡抑制基因Survivin與鼻咽癌相關(guān)關(guān)系的初步研究.pdf
- 鼻咽癌相關(guān)基因ID2與EMT關(guān)系的初步探討.pdf
- 鼻咽癌治療后遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素探討.pdf
- 鼻咽癌發(fā)生相關(guān)下調(diào)基因篩選及Annexin A6基因在鼻咽癌中的表達(dá)研究.pdf
- 中國(guó)鹵蟲(chóng)caveolin-1基因的克隆及功能的初步研究.pdf
- 鼻咽癌相關(guān)新基因的克隆及其功能研究.pdf
- 鼻咽癌干細(xì)胞的初步研究.pdf
- 鼻咽癌患者發(fā)生肺轉(zhuǎn)移的預(yù)后分析及相關(guān)基因的檢測(cè).pdf
- HPA、bFGF在鼻咽癌組織中的表達(dá)及與鼻咽癌侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)性.pdf
- 鼻咽癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移相關(guān)血清miRNAs的篩選及鑒定.pdf
- 鼻咽癌相關(guān)新基因LOC344967的功能研究.pdf
- 廣東鼻咽癌相關(guān)EB病毒BZLF1基因的突變分析及初步的功能學(xué)研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論